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DOHH-2
Tessuto
Versamento pleurico
Malattia
Linfoma diffuso a grandi cellule B
Sinonimi
DOHH2, DoHH-2, DOHH-2

Documenti

DOHH-2

Cell line · Codice prodotto 305537

DOHH-2 is a human diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell line that is used to model various aspects of B-cell malignancies, including drug resistance ...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

La DOHH-2 è una linea cellulare derivata dal linfoma diffuso a grandi cellule B (DLBCL) umano, utilizzata per studiare vari aspetti delle neoplasie a cellule B, tra cui la resistenza ai farmaci e l’efficacia terapeutica. Questa linea cellulare è particolarmente utile per valutare l’impatto delle terapie mirate e dei regimi combinati sulla crescita tumorale. Alcuni studi hanno dimostrato che le cellule DOHH-2 rispondono all’inibitore di Bcl-2 ABT-263 (navitoclax), che è stato testato in combinazione con vari agenti chemioterapici per potenziare l’efficacia del trattamento. Ad esempio, è stato osservato che l’aggiunta di ABT-263 all’etoposide e alla vincristina produce effetti additivi sulla sopravvivenza cellulare e sull’apoptosi, dimostrando il suo potenziale nel migliorare gli esiti nei trattamenti combinati per il DLBCL. Anche i modelli in vivo che coinvolgono le cellule DOHH-2 mostrano che la combinazione di ABT-263 con regimi come il CHOP può aumentare significativamente i tassi di risposta tumorale e ritardare la crescita del tumore, sottolineandone l’utilità nei test farmacologici preclinici.

Il DOHH-2 è stato inoltre studiato per la sua risposta a varie terapie mirate al di là della chemioterapia tradizionale. In particolare, la tripla combinazione dell’anticorpo anti-CD20 obinutuzumab con l’inibitore di Bcl-2 venetoclax e l’inibitore di MDM2 idasanutlin ha dimostrato un’efficacia superiore nel ridurre le dimensioni del tumore e nel raggiungere la remissione completa nei modelli preclinici. Questo approccio evidenzia il ruolo di DOHH-2 nel promuovere nuove strategie terapeutiche volte a ottenere un migliore controllo a lungo termine del DLBCL.

Tessuto
Versamento pleurico
Malattia
Linfoma diffuso a grandi cellule B
Sinonimi
  • DOHH2
  • DoHH-2
  • DOHH-2

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Sospensione
Presenza di OGM
GMO-S1
Dettagli sullo stato degli OGM
GMO-S1: This human lymphoma cell line (DOHH-2) contains EBV-derived genome fragments due to EBV transformation but does not release infectious virus. The modification is stably present in diffuse large B-cell lymphoma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Livello di biosicurezza
1

03Identificatori

Riferimento bibliografico
DOHH-2 (codice catalogo Cytion 305537)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_1179

04Espressione e suscettibilità

Virus
Trasformante: virus di Epstein-Barr (EBV).

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
RPMI 1640, w: 2,0 mM di glutammina stabile, w: 2,0 g/L di NaHCO3 (articolo Cytion numero 820700a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS inattivato termicamente
Subcoltura
Raccogliere le cellule in sospensione in una provetta da 15 ml e lavare delicatamente le cellule aderenti con PBS privo di calcio e magnesio (utilizzare 3-5 ml per le fiasche T25 e 5-10 ml per le fiasche T75). Applicare Accutase (1-2 ml per le beute T25, 2,5 ml per le beute T75) assicurando la copertura completa dello strato cellulare. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 10 minuti. Dopo l'incubazione, unire e centrifugare sia la sospensione che le cellule aderenti. Dopo la centrifugazione, risospendere accuratamente il pellet cellulare e trasferire la sospensione cellulare in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
3-5*10^5/ml
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Età dei donatori
60 anni
Etnia
Caucasico