Mine otse sisu juurde
DOHH-2
Kude
Pleuraefusioon
Haigus
Hajus suur B-rakuline lümfoom
Sünonüümid
DOHH2, DoHH-2, DOHH-2

Dokumendid

DOHH-2

Cell line · Toote number 305537

DOHH-2 is a human diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell line that is used to model various aspects of B-cell malignancies, including drug resistance ...

€430.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

DOHH-2 on inimese difuusse suure B-rakulise lümfoomi (DLBCL) rakuliin, mida kasutatakse B-rakkude pahaloomuliste kasvajate erinevate aspektide modelleerimiseks, sealhulgas ravimresistentsuse ja ravi tõhususe uurimiseks. See rakuliin on eriti väärtuslik sihtterapiate ja kombinatsioonravi mõju hindamisel kasvajate kasvule. Uuringud on näidanud, et DOHH-2 rakud reageerivad Bcl-2 inhibiitorile ABT-263 (navitoklaks), mida on testitud kombinatsioonis mitmesuguste kemoteraapiavahenditega ravi tõhususe suurendamiseks. Näiteks on leitud, et ABT-263 lisamine etoposiidile ja vinkristiinile avaldab aditiivset mõju rakkude ellujäämisele ja apoptoosile, mis näitab selle potentsiaali DLBCL-i kombinatsioonravi tulemuste parandamisel. DOHH-2-ga seotud in vivo mudelid näitavad samuti, et ABT-263 kombineerimine selliste raviskeemidega nagu CHOP võib oluliselt suurendada kasvaja ravivastuse määra ja aeglustada kasvaja kasvu, mis rõhutab selle kasulikkust ravimite prekliinilistes uuringutes.

DOHH-2-d on uuritud ka seoses selle reageerimisega erinevatele sihtterapiatele, mis ulatuvad kaugemale traditsioonilisest kemoteraapiast. Eelkõige näitas CD20-antikeha obinutuzumabi, Bcl-2-inhibiitori venetoklaksi ja MDM2-inhibiitori idasanutliini kolmik kombinatsioon prekliinilistes mudelites suurepärast tõhusust kasvaja suuruse vähendamisel ja täieliku remissiooni saavutamisel. See lähenemisviis rõhutab DOHH-2 rolli uute ravistrateegiate edendamisel, mille eesmärk on saavutada DLBCL-i parem pikaajaline kontroll.

Kude
Pleuraefusioon
Haigus
Hajus suur B-rakuline lümfoom
Sünonüümid
  • DOHH2
  • DoHH-2
  • DOHH-2

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Vedrustus
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This human lymphoma cell line (DOHH-2) contains EBV-derived genome fragments due to EBV transformation but does not release infectious virus. The modification is stably present in diffuse large B-cell lymphoma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Tunnused

Viide
DOHH-2 (Cytioni katalooginumber 305537)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_1179

04Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Viirused
Transformant: Epstein-Barr’i viirus (EBV).

05Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% soojusinaktiveeritud FBS-iga
Kultuuri edasikasvatamine
Koguge suspensioonirakud 15 ml tuubi ja peske kleepunud rakud ettevaatlikult PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium (kasutage 3-5 ml T25 kolbide puhul ja 5-10 ml T75 kolbide puhul). Kandke Accutase'i (1-2 ml T25 kolvidesse, 2,5 ml T75 kolvidesse), tagades rakukihi täieliku katvuse. Laske rakkudel 10 minutit toatemperatuuril inkubeerida. Pärast inkubeerimist ühendage ja tsentrifuugige nii suspensioon kui ka adherentsed rakud. Pärast tsentrifuugimist resuspendeerige rakupellet ettevaatlikult ja kandke rakususpensioon uutesse kolvidesse, mis sisaldavad värsket söötmeainet.
Külvitihedus
3–5 × 10⁵/ml
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

07Annetaja

Doonori vanus
60 aastat
Etniline kuuluvus
Kaukaasia