Pāriet uz saturu
DOHH-2
Audums
Pleiras izsvīdums
Slimība
Difūza lielo B šūnu limfoma
Sinonīmi
DOHH2, DoHH-2, DOHH-2

Dokumenti

DOHH-2

Cell line · Preces numurs 305537

DOHH-2 is a human diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell line that is used to model various aspects of B-cell malignancies, including drug resistance ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

DOHH-2 ir cilvēka difūzās lielu B šūnu limfomas (DLBCL) šūnu līnija, ko izmanto, lai modelētu dažādus B šūnu ļaundabīgo audzēju aspektus, tostarp rezistenci pret zālēm un ārstēšanas efektivitāti. Šī šūnu līnija ir īpaši vērtīga, lai novērtētu mērķtiecīgo terapiju un kombinēto ārstēšanas shēmu ietekmi uz audzēja augšanu. Pētījumi liecina, ka DOHH-2 šūnas reaģē uz Bcl-2 inhibitoru ABT-263 (navitoklaksu), kas ir pārbaudīts kombinācijā ar dažādiem ķīmijterapijas līdzekļiem, lai uzlabotu ārstēšanas efektivitāti. Piemēram, ir konstatēts, ka ABT-263 pievienošana etopozīdam un vinkristīnam rada sinerģisku efektu uz šūnu izdzīvošanu un apoptozi, liecinot par tā potenciālu uzlabot rezultātus DLBCL kombinētajā ārstēšanā. Arī in vivo modeļi, kuros iesaistītas DOHH-2 šūnas, liecina, ka ABT-263 kombinēšana ar tādām terapijām kā CHOP var ievērojami palielināt audzēja atbildes rādītājus un aizkavēt audzēja augšanu, kas uzsver šīs vielas lietderību pirmsklīniskajos zāļu pētījumos.

DOHH-2 ir pētīts arī saistībā ar tā reakciju uz dažādām mērķtiecīgām terapijām, kas pārsniedz tradicionālo ķīmijterapiju. Jo īpaši CD20 antivielas obinutuzumaba, Bcl-2 inhibitora venetoklaks un MDM2 inhibitora idasanutlīna trīskāršā kombinācija pirmsklīniskajos modeļos parādīja izcilu efektivitāti audzēja izmēra samazināšanā un pilnīgas remisijas sasniegšanā. Šī pieeja uzsver DOHH-2 nozīmi jaunu terapeitisko stratēģiju attīstībā, kuru mērķis ir panākt labāku DLBCL ilgtermiņa kontroli.

Audums
Pleiras izsvīdums
Slimība
Difūza lielo B šūnu limfoma
Sinonīmi
  • DOHH2
  • DoHH-2
  • DOHH-2

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atsperes
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This human lymphoma cell line (DOHH-2) contains EBV-derived genome fragments due to EBV transformation but does not release infectious virus. The modification is stably present in diffuse large B-cell lymphoma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Identifikatori

Atsauce
DOHH-2 (Cytion kataloga numurs 305537)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_1179

04Pazīmes un uzņēmība

Vīrusi
Transformants: Epšteina-Barra vīruss (EBV).

05Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,0 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% termiski inaktivētu FBS
Pārstādīšana
Savāc suspensijas šūnas 15 ml mēģenē un saudzīgi izmazgā pielipušās šūnas ar PBS bez kalcija un magnija (T25 kolbām izmanto 3-5 ml, bet T75 kolbām - 5-10 ml). Uzklājiet Accutase (1-2 ml T25 kolbām, 2,5 ml T75 kolbām), nodrošinot pilnīgu šūnu slāņa pārklājumu. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 10 minūtes. Pēc inkubācijas apvienot un centrifugēt gan suspensiju, gan pielipušās šūnas. Pēc centrifugēšanas uzmanīgi resuspendēt šūnu granulas un pārvietot šūnu suspensiju jaunās kolbās ar svaigu barotni.
Sēšanas blīvums
3–5 × 10⁵/ml
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

07Ziedotājs

Donora vecums
60 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis