İçeriğe atla
DOHH-2
Doku
Plevral efüzyon
Hastalık
Diffüz büyük B hücreli lenfoma
Eş anlamlılar
DOHH2, DoHH-2, DOHH-2

DOHH-2

Cell line · Ürün numarası 305537

DOHH-2 is a human diffuse large B-cell lymphoma (DLBCL) cell line that is used to model various aspects of B-cell malignancies, including drug resistance ...

€430.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

DOHH-2, ilaç direnci ve tedavi etkinliği dahil olmak üzere B hücresi malignitelerinin çeşitli yönlerini modellemek için kullanılan bir insan yaygın büyük B hücreli lenfoma (DLBCL) hücre hattıdır. Bu hücre hattı, hedefe yönelik tedavilerin ve kombinasyon rejimlerinin tümör büyümesi üzerindeki etkisini değerlendirmek açısından özellikle değerlidir. Çalışmalar, DOHH-2 hücrelerinin, tedavi etkinliğini artırmak amacıyla çeşitli kemoterapötik ajanlarla kombinasyon halinde test edilen Bcl-2 inhibitörü ABT-263’e (navitoklaks) yanıt verdiğini göstermiştir. Örneğin, etoposid ve vinkristine ABT-263'ün eklenmesinin, hücre sağkalımı ve apoptoz üzerinde artı etkiler sağladığı bulunmuştur; bu da, DLBCL için kombinasyon tedavilerinde sonuçları iyileştirme potansiyelini ortaya koymaktadır. DOHH-2'yi içeren in vivo modeller de, ABT-263'ün CHOP gibi rejimlerle birleştirilmesinin tümör yanıt oranlarını önemli ölçüde artırabileceğini ve tümör büyümesini geciktirebileceğini göstermekte olup, bu da ilacın preklinik testlerdeki yararını vurgulamaktadır.

DOHH-2, geleneksel kemoterapinin ötesindeki çeşitli hedefli tedavilere verdiği yanıt açısından da incelenmiştir. Özellikle, CD20 antikoru obinutuzumab ile Bcl-2 inhibitörü venetoklaks ve MDM2 inhibitörü idasanutlinin üçlü kombinasyonu, preklinik modellerde tümör boyutunu küçültme ve tam remisyona ulaşma konusunda üstün etkinlik göstermiştir. Bu yaklaşım, DLBCL’nin daha iyi uzun vadeli kontrolünü sağlamayı amaçlayan yeni tedavi stratejilerinin geliştirilmesinde DOHH-2’nin rolünü vurgulamaktadır.

Doku
Plevral efüzyon
Hastalık
Diffüz büyük B hücreli lenfoma
Eş anlamlılar
  • DOHH2
  • DoHH-2
  • DOHH-2

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Askıya alma
GDO durumu
GMO-S1
GDO durumuna ilişkin ayrıntılar
GMO-S1: This human lymphoma cell line (DOHH-2) contains EBV-derived genome fragments due to EBV transformation but does not release infectious virus. The modification is stably present in diffuse large B-cell lymphoma cells. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
DOHH-2 (Cytion katalog numarası 305537)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_1179

04İfade ve duyarlılık

Virüsler
Transformant: Epstein-Barr virüsü (EBV).

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 ısıyla inaktive edilmiş FBS ile destekleyin
Alt kültür oluşturma
Süspansiyon hücrelerini 15 ml'lik bir tüpte toplayın ve yapışık hücreleri kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile nazikçe yıkayın (T25 şişeleri için 3-5 ml ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın). Accutase uygulayın (T25 şişeler için 1-2 ml, T75 şişeler için 2,5 ml) ve hücre tabakasının tamamen kaplandığından emin olun. Hücreleri 10 dakika boyunca oda sıcaklığında inkübasyona bırakın. İnkübasyonun ardından, hem süspansiyonu hem de yapışık hücreleri birleştirin ve santrifüjleyin. Santrifüjden sonra hücre peletini dikkatlice yeniden süspanse edin ve hücre süspansiyonunu taze ortam içeren yeni şişelere aktarın.
Ekim yoğunluğu
3-5 × 10⁵/ml
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Bağışçının yaşı
60 yıl
Etnik köken
Kafkas