.jpg)
- Szövet
- Endocervix
- Betegség
- Adenokarcinóma
- Áttétes hely
- Az elsődleges daganat helye (endocervix)
Dokumentumok
HK-ZFN-AURKB-mEGFP sejtek
Cell line · Termékszám 300173
A HK-ZFN-AURKB-mEGFP sejtvonal egy génmódosított emberi sejtmodell, amelyet úgy alakítottak ki, hogy az AURKB (Aurora Kinase B) fehérjét mEGFP-vel (mo...) fúzionált formában fejezze ki...
Személyre szabás / Ajánlások
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP sejtekCell line€800.00
01Általános információk
- Leírás
A HK-ZFN-AURKB-mEGFP sejtvonal egy genetikailag módosított humán sejtmodell, amelyet az AURKB (Aurora Kinase B) fehérje mEGFP-vel (monomerikus Enhanced Green Fluorescent Protein) fuzionált expressziójára terveztek a cink-ujj nukleáz (ZFN) technológia segítségével. Az AURKB egy szerin/treonin kináz, amely döntő szerepet játszik a mitotikus kromoszómaszegregációban, a citokinézisben és a mitotikus orsó ellenőrzőpontjának szabályozásában. A mEGFP-vel való fúzió lehetővé teszi az AURKB aktivitásának és sejten belüli lokalizációjának valós idejű vizualizálását, ami megkönnyíti a sejtosztódás alatti dinamikus viselkedésének részletes vizsgálatát.
Ez a sejtvonal hatékony eszközként szolgál a mitózis molekuláris mechanizmusait és az AURKB specifikus funkcióit vizsgáló kutatók számára. A mEGFP beépítése lehetővé teszi a fluoreszcencia-alapú vizsgálatokat és az élő sejtek képalkotását, betekintést nyújtva az AURKB tér-időbeli eloszlásába. A ZFN technológia alkalmazása biztosítja a pontos genomiális integrációt, fenntartva az AURKB expresszió hűségét. Ez a modell különösen értékes a rákkutatásban, ahol az AURKB gyakran túlreprezentált és a tumorigenezishez kapcsolódik, ami a terápiás beavatkozások potenciális célpontjává teszi.
- Szövet
- Endocervix
- Betegség
- Adenokarcinóma
- Áttétes hely
- Az elsődleges daganat helye (endocervix)
- Alkalmazások
- Az Aurora B-kináz (AURKB) biológiája; mitotikus kinázok képalkotása; kromoszóma-szegregáció; orsó-ellenőrzőpont; élősejt-képalkotás; ZFN-alapú genomszerkesztés validálása; rákbiológia
02Osztályozás
- Organizmus
- Ember
- Szex
- Nő
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- GMO-státusz
- GMO-S1
- A GMO-státuszra vonatkozó részletek
- GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a ZFN-integrated mEGFP fusion at the endogenous AURKB locus for mitotic kinase imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Epithelszerű, mozaikos kő alakú sejtek
- Sejttípus
- Epithel sejtek
04Azonosítók
- Hivatkozás
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP (Cytion katalógusszám: 300173)
- NCBI adóazonosító szám
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VL13
- Betétes
- Az Ellenberg Labor (EMBL)
05Kifejeződés és fogékonyság
- Termékek
- EGFP (Fokozott zöld fluoreszcens fehérje)
06Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Folyadékcsere
- hetente 2-3 alkalommal
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
08Adományozó
- Az adományozó életkora
- 30 év
- Etnikai hovatartozás
- Afroamerikai
09Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Harmadik felekkel kötött megállapodások érvényesek
- Igen