Gå direkte til indholdet
HK-ZFN-AURKB-mEGFP-celler
Væv
Endocervix
Sygdom
Adenokarcinom
Metastasested
Primærtumorens placering (endocervix)

Dokumenter

HK-ZFN-AURKB-mEGFP-celler

Cell line · Varenummer 300173

HK-ZFN-AURKB-mEGFP-cellelinjen er en genetisk modificeret human cellemodel, der er udviklet til at udtrykke AURKB-proteinet (Aurora Kinase B) fusioneret med mEGFP (mo...

€800.00ekskl. moms og fragt
Fremstillet på bestilling
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HK-ZFN-AURKB-mEGFP-cellelinjen er en genetisk konstrueret human cellemodel, der er designet til at udtrykke AURKB (Aurora Kinase B)-proteinet fusioneret med mEGFP (monomeric Enhanced Green Fluorescent Protein) ved hjælp af Zinc Finger Nuclease (ZFN)-teknologi. AURKB er en serin/threonin-kinase, der spiller en afgørende rolle i mitotisk kromosomadskillelse, cytokinese og regulering af det mitotiske spindelkontrolpunkt. Fusionen med mEGFP giver mulighed for realtidsvisualisering af AURKB's aktivitet og lokalisering i cellen, hvilket muliggør detaljerede undersøgelser af dens dynamiske adfærd under celledelingen.

Denne cellelinje fungerer som et stærkt værktøj for forskere, der undersøger de molekylære mekanismer i mitose og de specifikke funktioner i AURKB. Inkorporeringen af mEGFP muliggør fluorescensbaserede analyser og billeddannelse i levende celler, hvilket giver indsigt i den spatiotemporale fordeling af AURKB. Brugen af ZFN-teknologi sikrer præcis genomisk integration og opretholder troværdigheden af AURKB-ekspressionen. Denne model er særlig værdifuld inden for kræftforskning, hvor AURKB ofte er overudtrykt og forbundet med tumorigenese, hvilket gør den til et potentielt mål for terapeutiske indgreb.

Væv
Endocervix
Sygdom
Adenokarcinom
Metastasested
Primærtumorens placering (endocervix)
Anvendelser
Aurora B-kinase (AURKB) -biologi; billeddannelse af mitotiske kinaser; kromosomadskillelse; spindel-checkpoint; billeddannelse af levende celler; validering af ZFN-genomredigering; kræftbiologi

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a ZFN-integrated mEGFP fusion at the endogenous AURKB locus for mitotic kinase imaging. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epithel-lignende celler med mosaikstenform
Celletype
Epitheliale celler

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HK-ZFN-AURKB-mEGFP (Cytion katalognummer 300173)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_VL13
Indskyder
Ellenberg-laboratoriet (EMBL)

05Udtryk og modtagelighed

Produkter
EGFP (forstærket grønt fluorescerende protein)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
30 år
Etnisk tilhørsforhold
Afroamerikaner