Células HK-ZFN-AURKB-mEGFP

A linha celular HK-ZFN-AURKB-mEGFP é um modelo celular humano geneticamente modificado, concebido para exprimir a proteína AURKB (Aurora Kinase B) em fusão com a mEGFP (proteína fluorescente verde melhorada monomérica), utilizando a tecnologia Zinc Finger Nuclease (ZFN). A AURKB é uma serina/treonina quinase que desempenha um papel crucial na segregação cromossómica mitótica, na citocinese e na regulação do ponto de controlo do fuso mitótico. A fusão com mEGFP permite a visualização em tempo real da atividade e localização da AURKB na célula, facilitando estudos detalhados do seu comportamento dinâmico durante a divisão celular.

Esta linha celular serve como uma ferramenta poderosa para os investigadores que investigam os mecanismos moleculares da mitose e as funções específicas da AURKB. A incorporação de mEGFP permite ensaios baseados em fluorescência e imagens de células vivas, fornecendo informações sobre a distribuição espácio-temporal de AURKB. A utilização da tecnologia ZFN assegura uma integração genómica precisa, mantendo a fidelidade da expressão da AURKB. Este modelo é particularmente valioso na investigação do cancro, em que a AURKB está frequentemente sobre-expressa e associada à tumorigénese, o que a torna um alvo potencial para intervenções terapêuticas.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia