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WB-F344
Tessuto
Fegato
Sinonimi
WB F344, WBF344

Documenti

WB-F344

Cell line · Codice prodotto 305201

La linea cellulare epiteliale epatica di ratto WB-F344 è una linea non tumorigenica ampiamente utilizzata negli studi incentrati sulla fisiologia epatica, la tossicologia e la carcinogenesi...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare epiteliale epatica di ratto WB-F344 è una linea non tumorigenica ampiamente utilizzata negli studi di fisiologia epatica, tossicologia e cancerogenesi. Originate da fegato normale di ratto adulto, queste cellule sono state inizialmente derivate per facilitare le indagini sui meccanismi di rigenerazione epatica e sulla bioattivazione di agenti chimici cancerogeni in vitro. Sono diploidi e presentano caratteristiche cariotipiche stabili, tipiche delle cellule epatiche normali di ratto, che le rendono un modello prezioso per gli studi genetici e citologici.

Le cellule WB-F344 sono particolarmente note per la loro capacità di differenziarsi in strutture simili ai dotti biliari in risposta a determinati stimoli, il che le rende uno strumento eccellente per lo studio della funzione e della patologia dell'epitelio biliare. La loro robusta risposta ai fattori di crescita e la loro capacità di subire trasformazioni oncogeniche in condizioni sperimentali specifiche forniscono anche una piattaforma per esplorare le vie molecolari coinvolte nelle malattie epatiche e nel cancro. Inoltre, queste cellule sono state impiegate in studi che hanno valutato la tossicità epatica di composti ambientali e farmaceutici, fornendo approfondimenti critici sulla risposta degli epatociti all'esposizione agli xenobiotici.

Grazie alla loro natura ben caratterizzata e alla versatilità nelle applicazioni di ricerca, le cellule WB-F344 rappresentano un modello fondamentale nella ricerca epatologica. Il loro uso ha contribuito in modo significativo alla comprensione della biologia del fegato, in particolare nelle aree relative alla differenziazione cellulare, alla carcinogenesi e alla risposta epatica alle lesioni e agli insulti chimici.

Tessuto
Fegato
Sinonimi
  • WB F344
  • WBF344

02Classificazione

Organismo
Ratto
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Epiteliale

04Identificatori

Riferimento bibliografico
WB-F344 (numero di catalogo Cytion 305201)
Codice fiscale NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_9806

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Aggiungere al terreno di coltura il 7% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Razza / sottospecie
Fischer 344
Età dei donatori
Adulti