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WB-F344
Tecido
Fígado
Sinónimos
WB F344, WBF344

Documentos

WB-F344

Cell line · Número do produto 305201

A linha celular epitelial do fígado de rato WB-F344 é uma linha não tumorigénica amplamente utilizada em estudos centrados na fisiologia, toxicologia e carcinogénese do fígado...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular epitelial de fígado de rato WB-F344 é uma linha não tumorigénica amplamente utilizada em estudos focados na fisiologia, toxicologia e carcinogénese do fígado. Originárias do fígado normal de ratos adultos, estas células foram inicialmente derivadas para facilitar investigações sobre os mecanismos de regeneração hepática e a bioativação de carcinógenos químicos in vitro. São diplóides, exibindo características cariotípicas estáveis que são características das células hepáticas normais de ratos, tornando-as um modelo valioso para estudos genéticos e citológicos.

As células WB-F344 são particularmente conhecidas pela sua capacidade de se diferenciarem em estruturas semelhantes a ductos biliares em resposta a certos estímulos, o que as torna uma excelente ferramenta para estudar a função e a patologia epitelial biliar. A sua resposta robusta aos fatores de crescimento e a sua capacidade de sofrer transformação oncogênica em condições experimentais específicas também fornecem uma plataforma para explorar as vias moleculares envolvidas em doenças hepáticas e câncer. Além disso, estas células têm sido utilizadas em estudos que avaliam a toxicidade hepática de compostos ambientais e farmacêuticos, fornecendo informações críticas sobre a resposta dos hepatócitos à exposição a xenobióticos.

Devido à sua natureza bem caracterizada e versatilidade em aplicações de investigação, as células WB-F344 servem como um modelo fundamental na investigação hepatológica. A sua utilização contribuiu significativamente para a nossa compreensão da biologia do fígado, particularmente em áreas relacionadas com a diferenciação celular, carcinogénese e resposta hepática a lesões e agressões químicas.

Tecido
Fígado
Sinónimos
  • WB F344
  • WBF344

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Epitelial

04Identificadores

Referência
WB-F344 (número de catálogo da Cytion 305201)
Número de identificação fiscal do NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_9806

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
EMEM (MEM Eagle), com: 2 mM L-Glutamina, com: 2,2 g/L NaHCO3, com: EBSS (número de artigo Cytion 820100a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Adicione ao meio 7 % de FBS e 1 % de NEAA
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Raça / subespécie
Fischer 344
Idade do dador
Adulto