コンテンツへスキップ
HK-CRISPR-Nup188-mEGFP
ティッシュ
子宮内頸部
病気
腺癌
転移部位
該当なし（HeLaの京都派生株；原発腫瘍部位は子宮頸管内）

文書

HK-CRISPR-Nup188-mEGFP

Cell line · 製品番号 300657

HK-CRISPR-Nup188-mEGFP is a genetically modified Hela Kyoto cell line. It uses CRISPR/Cas9 technology to integrate mEGFP (monomeric Enhanced Green Fluores...

€800.00税・送料別

カスタマイズ／おすすめ

在庫あり
ロット
おすすめ（最も新しいロット）
  • CoA
1

01概要

説明

HK-CRISPR-Nup188-mEGFPは、遺伝子組換えHela京都細胞株である。CRISPR/Cas9技術を用いて、Nup188遺伝子座にmEGFP（単量体増強緑色蛍光タンパク質）を組み込む。Nup188は核膜孔複合体に関与する重要なヌクレオポリンタンパク質で、核と細胞質間の分子輸送に必須である。mEGFPタグはNup188のリアルタイム可視化を可能にし、核膜孔複合体の動態と機能の研究に役立つ。

この細胞株は、核輸送と核膜孔複合体の生物学に焦点をあてる研究者にとって特に有用である。蛍光タギングにより、薬物治療や遺伝子改変を含む様々な条件下でのNup188の観察が可能である。ハイコンテントスクリーニング、ライブセルイメージング、その他の蛍光ベースの技術への応用が可能であり、核細胞質輸送や核膜の完全性に関する貴重な知見を提供する。

ティッシュ
子宮内頸部
病気
腺癌
転移部位
該当なし（HeLaの京都派生株；原発腫瘍部位は子宮頸管内）
用途
核孔複合体（NPC）の生物学；核・細胞質間輸送；Nup188の動態と機能；核膜の生細胞蛍光イメージング；ハイコンテンツスクリーニング；CRISPRノックインの検証研究；核内輸送阻害剤の評価

02分類

生物
人間
セックス
女性
成長特性
アドヘレント
GMOの有無
GMO-S1
GMOのステータスに関する詳細
GMO-S1: This HeLa Kyoto line contains a CRISPR knock-in of mEGFP at the Nup188 locus, enabling visualization of nuclear pore scaffold dynamics. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
モザイク状の石の形をした上皮様細胞
細胞の種類
上皮細胞

04識別子

引用
HK-CRISPR-Nup188-mEGFP（Cytionカタログ番号300657）
NCBI 納税者番号
9606
セロサウルス
Not assigned (HK-CRISPR-Nup188-mEGFP is a CRISPR-modified HeLa Kyoto derivative; parental HeLa Kyoto CVCL_1922)
預金者
エレンバーグ・ラボ（EMBL）

05発現と感受性

タンパク質の発現
Nup188、mEGFPタグ

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w：4.5g/Lグルコース、w：4mM L-グルタミン、w：3.7g/L NaHCO3、w：1.0mMピルビン酸ナトリウム（Cytion品番820300a）
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
解凍と培養

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地（FBSを含む）＋10％DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1（Cytionカタログ番号800100）を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

ドナーの年齢
30年
民族
アフリカ系アメリカ人