Pereiti prie turinio
HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry ląstelės
Audinys
Endocervix
Liga
Adenokarcinoma
Metastazių vieta
Pirminės naviko lokalizacijos vieta (gimdos kaklelio vidinė dalis)
Sinonimai
HK-ZFN-AURKB-mEGFP, ZFN-INCENP-mCherry

Dokumentai

HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry ląstelės

Cell line · Prekės numeris 300270

Ląstelių linija HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry, išvestas iš „HeLa Kyoto“ ląstelių, yra specializuotas modelis, naudojamas ląstelių biologijos tyrimuose. Ji buvo...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry ląstelių linija, gauta iš HeLa Kyoto ląstelių, yra specializuotas ląstelių biologijos tyrimams naudojamas modelis. Ji buvo genetiškai sukurta taip, kad ekspresuotų Aurora B kinazę (AURKB), pažymėtą monomeriniu sustiprintu žaliuoju fluorescenciniu baltymu (mEGFP), ir vidinį centromeros baltymą (INCENP), pažymėtą mCherry. Šios modifikacijos leidžia mokslininkams stebėti šių baltymų dinamiką ir sąveiką ląstelės dalijimosi metu. Aurora B kinazė yra būtina chromosomų segregacijai ir citokinezei, o INCENP yra labai svarbi chromosomų keleivio komplekso (CPC) sudedamoji dalis, koordinuojanti mitozės eigą.

Šis dvigubas fluorescencinis žymėjimas yra galingas įrankis gyvų ląstelių vaizdavimui, leidžiantis išsamiai ištirti baltymų pasiskirstymą ląstelės ciklo metu. HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry ląstelių linija yra vertinga tiriant mitozės reguliavimą, chromosomų stabilumą ir mitozės kontrolės tašką. Genetinėms modifikacijoms naudojamos cinko pirštų nukleazės (ZFN) užtikrina šio modelio tikslumą, todėl jis idealiai tinka didelio tikslumo tyrimams vėžio biologijos ir terapijos srityje.

Audinys
Endocervix
Liga
Adenokarcinoma
Metastazių vieta
Pirminės naviko lokalizacijos vieta (gimdos kaklelio vidinė dalis)
Paraiškos
Chromosomų keleivių komplekso (CPC) biologija; „Aurora B“ kinazės ir INCENP dinamika; gyvų ląstelių mitozių vaizdinimas; dviejų spalvų fluorescencinis sekimas; chromosomų segregacija; citokinezė; mitozinis kontrolinis taškas; ZFN genomo redagavimo patvirtinimas
Sinonimai
  • HK-ZFN-AURKB-mEGFP
  • ZFN-INCENP-mCherry

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Moteris
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This HeLa Kyoto dual-color line contains ZFN-engineered AURKB-mEGFP and INCENP-mCherry constructs for chromosome passenger complex studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašios ląstelės su mozaikos formos akmenukais
Ląstelių tipas
Epitelio ląstelės

04Identifikatoriai

Nuoroda
HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry (Cytion katalogo numeris 300270)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_VL14
Indėlininkas
Ellenbergo laboratorija (EMBL)

05Išraiška ir jautrumas

Produktai
EGFP (sustiprintas žaliasis fluorescuojantis baltymas)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
30 metų
Etninė priklausomybė
Afroamerikietis