- Tkanivo
- Endocervix
- Choroba
- Adenokarcinóm
- Miesto metastáz
- Miesto primárneho nádoru (endocervix)
- Synonymá
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP, ZFN-INCENP-mCherry
Dokumenty
Bunky HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry
Cell line · Číslo výrobku 300270
Bunková línia HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry, odvodená z buniek HeLa Kyoto, je špecializovaný model používaný vo výskume bunkovej biológie. Bola...
Prispôsobenie / Odporúčania
- Bunky HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherryCell line€800.00
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
01Všeobecné informácie
- Popis
Bunková línia HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry odvodená od buniek HeLa Kyoto je špecializovaný model používaný vo výskume bunkovej biológie. Bola geneticky upravená tak, aby exprimovala kinázu Aurora B (AURKB) označenú monomérnym zosilneným zeleným fluorescenčným proteínom (mEGFP) a vnútorný centromérový proteín (INCENP) označený mCherry. Tieto modifikácie umožňujú výskumníkom sledovať dynamiku a interakcie týchto proteínov počas delenia buniek. Kináza Aurora B je nevyhnutná pre segregáciu chromozómov a cytokinézu, zatiaľ čo INCENP je kritickou zložkou chromozómového komplexu (Chromosomal Passenger Complex - CPC), ktorý koordinuje priebeh mitózy.
Toto duálne fluorescenčné značenie poskytuje výkonný nástroj na zobrazovanie živých buniek, ktorý umožňuje podrobné štúdium distribúcie proteínov počas bunkového cyklu. Bunková línia HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry je cenná na výskum mitotickej regulácie, chromozomálnej stability a mitotického kontrolného bodu. Presnosť nukleáz so zinkovými prstami (ZFN) používaných na genetické modifikácie zabezpečuje presnosť tohto modelu, vďaka čomu je ideálny na vysoko presné štúdie v oblasti biológie rakoviny a vývoja terapií.
- Tkanivo
- Endocervix
- Choroba
- Adenokarcinóm
- Miesto metastáz
- Miesto primárneho nádoru (endocervix)
- Aplikácie
- Biológia komplexu chromozómových „cestujúcich“ (CPC); dynamika kinázy Aurora B a proteínu INCENP; zobrazovanie mitózy v živých bunkách; dvojfarebné fluorescenčné sledovanie; segregácia chromozómov; cytokinéza; mitotický kontrolný bod; validácia úpravy genómu pomocou ZFN
- Synonymá
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP
- ZFN-INCENP-mCherry
02Klasifikácia
- Organizmus
- Človek
- Sex
- Žena
- Rastové vlastnosti
- Prívrženec
- Stav GMO
- GMO-S1
- Podrobnosti o štatúte GMO
- GMO-S1: This HeLa Kyoto dual-color line contains ZFN-engineered AURKB-mEGFP and INCENP-mCherry constructs for chromosome passenger complex studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- 1
03Charakteristiky
- Morfológia
- Epitelové bunky s mozaikovým tvarom kameňa
- Typ bunky
- Epitelové bunky
04Identifikátory
- Citácia
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry (katalógové číslo Cytion 300270)
- Daňové identifikačné číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VL14
- Vkladateľ
- Ellenbergova laboratória (EMBL)
05Prejav a náchylnosť
- Produkty
- EGFP (zosilnený zelený fluorescenčný proteín)
06Manipulácia a kultivácia
- Kultivačné médium
- DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutamínu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
- Inkubačná atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplnky stravy
- Doplňte médium o 10 % FBS
- Disociačné činidlo
- Accutase
- Rozmnožovanie kultúr
- Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
- Obnova kvapaliny
- 2 až 3-krát týždenne
- Rozmrazovanie a kultivácia
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervácia
- Sterilita
Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.
Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.
- Mrazové médium
- Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
- Podmienky skladovania
Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.
- Dopravné podmienky
Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
08Darca
- Vek darcu
- 30 rokov
- Etnická príslušnosť
- Afroameričan
09Právne informácie a bezpečnosť
- Bezpečnostné opatrenia
- Pri plánovaní uskladnenia kryovírusu v kvapalnom dusíku na budúce rozmrazenie je potrebné dodržiavať prísne bezpečnostné opatrenia. Vhodné ochranné rukavice a odev sú nevyhnutné a počas prenosu zmrazených vzoriek do nádrže s tekutým dusíkom alebo z nej sa vyžaduje používanie tvárovej masky alebo ochranných okuliarov. Je to z dôvodu zníženia rizika poranenia v dôsledku možnej explózie kryovírusu pri vyberaní, ktorá môže mať za následok vymrštenie ostrých úlomkov.
- Záruka
V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste
Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke
- Platia zmluvy s tretími stranami
- Áno