Gå direkte til indholdet
HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry-celler
Væv
Endocervix
Sygdom
Adenokarcinom
Metastasested
Primærtumorens placering (endocervix)
Synonymer
HK-ZFN-AURKB-mEGFP, ZFN-INCENP-mCherry

Dokumenter

HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry-celler

Cell line · Varenummer 300270

Cellelinjen HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry, der stammer fra HeLa Kyoto-celler, er en specialiseret model, der anvendes i forskning inden for cellebiologi. Den er blevet ...

€800.00ekskl. moms og fragt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalet (det nyeste parti)
1

01Generelle oplysninger

Beskrivelse

HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry-cellelinjen, der stammer fra HeLa Kyoto-celler, er en specialiseret model, der bruges i cellebiologisk forskning. Den er blevet genetisk manipuleret til at udtrykke Aurora B-kinase (AURKB) mærket med monomert forstærket grønt fluorescerende protein (mEGFP) og Indre Centromer Protein (INCENP) mærket med mCherry. Disse modifikationer gør det muligt for forskere at spore disse proteiners dynamik og interaktion under celledeling. Aurora B-kinase er afgørende for kromosomadskillelse og cytokinese, mens INCENP er en kritisk komponent i Chromosomal Passenger Complex (CPC), der koordinerer mitotisk progression.

Denne dobbelte fluorescerende mærkning giver et stærkt værktøj til billeddannelse i levende celler, hvilket giver mulighed for detaljeret undersøgelse af proteindistributionen under cellecyklussen. HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry-cellelinjen er værdifuld til forskning i mitotisk regulering, kromosomal stabilitet og det mitotiske checkpoint. Præcisionen af zinkfingernukleaser (ZFN'er), der bruges til genetiske modifikationer, sikrer nøjagtigheden af denne model, hvilket gør den ideel til high-fidelity-undersøgelser inden for kræftbiologi og terapeutisk udvikling.

Væv
Endocervix
Sygdom
Adenokarcinom
Metastasested
Primærtumorens placering (endocervix)
Anvendelser
Biologi vedrørende Chromosomal Passenger Complex (CPC); dynamikken i Aurora B-kinase og INCENP; billeddannelse af mitose i levende celler; tofarvet fluorescenssporing; kromosomadskillelse; cytokinese; mitotisk checkpoint; validering af ZFN-genomredigering
Synonymer
  • HK-ZFN-AURKB-mEGFP
  • ZFN-INCENP-mCherry

02Klassificering

Organisme
Menneske
Køn
Kvinde
Vækstegenskaber
Tilhænger
GMO-status
GMO-S1
Oplysninger om GMO-status
GMO-S1: This HeLa Kyoto dual-color line contains ZFN-engineered AURKB-mEGFP and INCENP-mCherry constructs for chromosome passenger complex studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhedsniveau
1

03Egenskaber

Morfologi
Epithel-lignende celler med mosaikstenform
Celletype
Epitheliale celler

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry (Cytion katalognummer 300270)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_VL14
Indskyder
Ellenberg-laboratoriet (EMBL)

05Udtryk og modtagelighed

Produkter
EGFP (forstærket grønt fluorescerende protein)

06Håndtering og opdræt

Næringsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukose, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfære

37°C, 5%CO2, befugtet atmosfære.

Kosttilskud
Suppler mediet med 10% FBS
Dissociationsreagens
Accutase
Oddyrkning
Fjern det gamle medium fra de klæbende celler, og vask dem med PBS, der ikke indeholder calcium og magnesium. Brug 3-5 ml PBS til T25-kolber og 5-10 ml til T75-kolber. Dæk derefter cellerne helt med Accutase, brug 1-2 ml til T25-kolber og 2,5 ml til T75-kolber. Lad cellerne inkubere ved stuetemperatur i 8-10 minutter for at løsne dem. Efter inkubationen blandes cellerne forsigtigt med 10 ml medium for at resuspendere dem, og centrifugeres derefter ved 300xg i 3 minutter. Kassér supernatanten, resuspender cellerne i frisk medium, og overfør dem til nye kolber, der allerede indeholder frisk medium.
Væskeudskiftning
2 til 3 gange om ugen
Optøning og dyrkning
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontrol og kryopræservering

Sterilitet

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

Frysemedium
Som kryopræserveringsmedium bruger vi komplet vækstmedium (inklusive FBS) + 10 % DMSO for tilstrækkelig levedygtighed efter optøning eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som indeholder optimerede osmobeskyttende stoffer og metaboliske stabilisatorer for at forbedre genopretningen og reducere kryo-induceret stress.
Opbevaringsbetingelser

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Leveringsbetingelser

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

08Donor

Donorens alder
30 år
Etnisk tilhørsforhold
Afroamerikaner