- Weefsel
- Endocervix
- Ziekte
- Adenocarcinoom
- Plaats van uitzaaiingen
- Locatie van de primaire tumor (endocervix)
- Synoniemen
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP, ZFN-INCENP-mCherry
Documenten
HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry-cellen
Cell line · Productnummer 300270
De HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry-cellijn, afgeleid van HeLa Kyoto-cellen, is een gespecialiseerd model dat wordt gebruikt in onderzoek op het gebied van de celbiologie. Het is ...
Maatwerk / Aanbevelingen
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry-cellenCell line€800.00
Aanbevolen (verste partij)
01Algemene informatie
- Beschrijving
De HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry cellijn, afgeleid van HeLa Kyoto-cellen, is een gespecialiseerd model dat gebruikt wordt in celbiologisch onderzoek. Het is genetisch gemodificeerd om Aurora B kinase (AURKB) gelabeld met monomeer versterkt groen fluorescerend eiwit (mEGFP) en Inner Centromere Protein (INCENP) gelabeld met mCherry tot expressie te brengen. Deze modificaties stellen onderzoekers in staat om de dynamica en interacties van deze eiwitten tijdens de celdeling te volgen. Aurora B kinase is essentieel voor chromosoomsegregatie en cytokinese, terwijl INCENP een cruciaal onderdeel is van het Chromosomal Passenger Complex (CPC), dat mitotische progressie coördineert.
Deze dubbele fluorescente markering biedt een krachtig hulpmiddel voor live-cel beeldvorming, waardoor gedetailleerde studie van de distributie van eiwitten tijdens de celcyclus mogelijk is. De HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry cellijn is waardevol voor onderzoek naar mitotische regulatie, chromosomale stabiliteit en het mitotische checkpoint. De precisie van zinkvingernucleasen (ZFN's) die worden gebruikt voor genetische modificaties zorgt voor de nauwkeurigheid van dit model, waardoor het ideaal is voor high-fidelity studies in de kankerbiologie en therapeutische ontwikkeling.
- Weefsel
- Endocervix
- Ziekte
- Adenocarcinoom
- Plaats van uitzaaiingen
- Locatie van de primaire tumor (endocervix)
- Toepassingen
- Biologie van het chromosomale passagierscomplex (CPC); dynamica van Aurora B-kinase en INCENP; beeldvorming van mitose in levende cellen; tweekleurige fluorescentietracking; chromosoomsegregatie; cytokinese; mitotisch controlepunt; validatie van genoombewerking met ZFN’s
- Synoniemen
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP
- ZFN-INCENP-mCherry
02Classificatie
- Organisme
- Mens
- Seks
- Vrouw
- Groei-eigenschappen
- Aanhanger
- GGO-status
- GMO-S1
- Details over de GGO-status
- GMO-S1: This HeLa Kyoto dual-color line contains ZFN-engineered AURKB-mEGFP and INCENP-mCherry constructs for chromosome passenger complex studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Bioveiligheidsniveau
- 1
03Kenmerken
- Morfologie
- Epitheelachtige cellen met mozaïeksteenvorm
- Celtype
- Epitheelcellen
04Identificatiegegevens
- Bronvermelding
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry (Cytion catalogusnummer 300270)
- NCBI-belastingnummer
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VL14
- Inlegger
- Het Ellenberg Lab (EMBL)
05Expressie en vatbaarheid
- Producten
- EGFP (verbeterd groen fluorescerend eiwit)
06Behandeling en kweek
- Kweekmedium
- DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
- Incubatieomgeving
37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.
- Supplementen
- Vul het medium aan met 10% FBS
- Dissociatiereagens
- Accutase
- Heruitplanten
- Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
- Vloeistofverversing
- 2 tot 3 keer per week
- Ontdooien en kweken
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie
- Onvruchtbaarheid
Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.
Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.
- Kweekmedium invriezen
- Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
- Opslagvoorwaarden
Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.
- Verzendvoorwaarden
Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.
08Donateur
- Leeftijd van de donor
- 30 jaar
- Etnische afkomst
- Afro-Amerikaan
09Juridische en veiligheidsaspecten
- Veiligheidsmaatregelen
- Wanneer men van plan is om een cryovial in vloeibare stikstof op te slaan om later te ontdooien, is het verplicht om strenge veiligheidsmaatregelen in acht te nemen. Passende beschermende handschoenen en kleding zijn essentieel en het gebruik van een gezichtsmasker of veiligheidsbril is vereist tijdens het overbrengen van bevroren monsters naar of uit de tank met vloeibare stikstof. Dit is om het risico op letsel door mogelijke cryoviale explosies bij het verwijderen te beperken, wat kan resulteren in de projectie van scherpe fragmenten.
- Garantie
Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad
Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring
- Er gelden overeenkomsten met derden
- Ja