Gå til innholdet
HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry-celler
Vev
Endocervix
Sykdom
Adenokarsinom
Metastaseområde
Primær tumorlokalisering (endocervix)
Synonymer
HK-ZFN-AURKB-mEGFP, ZFN-INCENP-mCherry

Dokumenter

HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry-celler

Cell line · Produktnummer 300270

Cellelinjen HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry, som stammer fra HeLa Kyoto-celler, er en spesialisert modell som brukes i cellebiologisk forskning. Den har blitt ...

€800.00ekskl. mva. og frakt

Tilpasning / Anbefalinger

På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry-cellelinjen, som er avledet fra HeLa Kyoto-celler, er en spesialisert modell som brukes i cellebiologisk forskning. Den er genetisk modifisert til å uttrykke Aurora B-kinase (AURKB) merket med monomert forsterket grønt fluorescerende protein (mEGFP) og Inner Centromere Protein (INCENP) merket med mCherry. Disse modifikasjonene gjør det mulig for forskere å spore dynamikken og interaksjonene mellom disse proteinene under celledeling. Aurora B-kinase er avgjørende for kromosomsegregering og cytokinese, mens INCENP er en kritisk komponent i Chromosomal Passenger Complex (CPC), som koordinerer mitotisk progresjon.

Denne doble fluorescerende merkingen gir et kraftig verktøy for avbildning av levende celler, noe som gjør det mulig å studere proteindistribusjonen i løpet av cellesyklusen i detalj. HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry-cellelinjen er verdifull for forskning på mitotisk regulering, kromosomal stabilitet og det mitotiske sjekkpunktet. Presisjonen til sinkfingernukleaser (ZFN) som brukes til genetiske modifikasjoner, sikrer nøyaktigheten til denne modellen, noe som gjør den ideell for studier av kreftbiologi og terapeutisk utvikling.

Vev
Endocervix
Sykdom
Adenokarsinom
Metastaseområde
Primær tumorlokalisering (endocervix)
Søknader
Biologi knyttet til kromosomalt passasjerkompleks (CPC); dynamikken mellom Aurora B-kinase og INCENP; avbildning av mitose i levende celler; tofarget fluorescenssporing; kromosomseparasjon; cytokinese; mitotisk kontrollpunkt; validering av ZFN-genomredigering
Synonymer
  • HK-ZFN-AURKB-mEGFP
  • ZFN-INCENP-mCherry

02Klassifisering

Organisme
Menneske
Sex
Kvinne
Vekstegenskaper
Tilhenger
GMO-status
GMO-S1
Detaljer om GMO-status
GMO-S1: This HeLa Kyoto dual-color line contains ZFN-engineered AURKB-mEGFP and INCENP-mCherry constructs for chromosome passenger complex studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende celler med mosaikksteinform
Celletype
Epitelceller

04Identifikatorer

Kildehenvisning
HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry (Cytion katalognummer 300270)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_VL14
Innskjærer
Ellenberg-laboratoriet (EMBL)

05Uttrykk og mottakelighet

Produkter
EGFP (Enhanced Green Fluorescent Protein)

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Donorens alder
30 år
Etnisitet
Afroamerikaner