- Tkáň
- Endocervix
- Nemoc
- Adenokarcinom
- Místo metastázy
- Místo primárního nádoru (endocervix)
- Synonyma
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP, ZFN-INCENP-mCherry
Dokumenty
Buňky HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry
Cell line · Číslo výrobku 300270
Buněčná linie HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry, odvozená z buněk HeLa Kyoto, je specializovaný model používaný ve výzkumu buněčné biologie. Byla ...
Přizpůsobení / Doporučení
- Buňky HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherryCell line€800.00
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
01Obecné informace
- Popis
Buněčná linie HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry, odvozená od buněk HeLa Kyoto, je specializovaný model používaný ve výzkumu buněčné biologie. Byla geneticky upravena tak, aby exprimovala kinázu Aurora B (AURKB) značenou monomerním zesíleným zeleným fluorescenčním proteinem (mEGFP) a vnitřní centromerový protein (INCENP) značený mCherry. Tyto modifikace umožňují vědcům sledovat dynamiku a interakce těchto proteinů během buněčného dělení. Kináza Aurora B je nezbytná pro segregaci chromozomů a cytokinezi, zatímco INCENP je kritickou součástí komplexu CPC (Chromosomal Passenger Complex), který koordinuje průběh mitózy.
Toto duální fluorescenční značení poskytuje výkonný nástroj pro zobrazování živých buněk, který umožňuje podrobné studium distribuce proteinů během buněčného cyklu. Buněčná linie HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry je cenná pro výzkum mitotické regulace, chromozomální stability a mitotického kontrolního bodu. Přesnost nukleáz zinkových prstů (ZFN) používaných pro genetické modifikace zajišťuje přesnost tohoto modelu, takže je ideální pro vysoce věrné studie v biologii rakoviny a vývoji léčebných postupů.
- Tkáň
- Endocervix
- Nemoc
- Adenokarcinom
- Místo metastázy
- Místo primárního nádoru (endocervix)
- Aplikace
- Biologie chromozomálního komplexu „passenger“ (CPC); dynamika kinázy Aurora B a proteinu INCENP; zobrazování mitózy v živých buňkách; dvoubarevné fluorescenční sledování; segregace chromozomů; cytokinéza; mitotický kontrolní bod; validace úpravy genomu pomocí ZFN
- Synonyma
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP
- ZFN-INCENP-mCherry
02Klasifikace
- Organismus
- Člověk
- Sex
- Žena
- Růstové vlastnosti
- Přívrženec
- Stav GMO
- GMO-S1
- Podrobnosti o statusu GMO
- GMO-S1: This HeLa Kyoto dual-color line contains ZFN-engineered AURKB-mEGFP and INCENP-mCherry constructs for chromosome passenger complex studies. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Úroveň biologické bezpečnosti
- 1
03Charakteristika
- Morfologie
- Buňky podobné epitelu s mozaikovitým tvarem kamínků
- Typ buňky
- Epitelové buňky
04Identifikátory
- Citace
- HK-ZFN-AURKB-mEGFP/ZFN-INCENP-mCherry (katalogové číslo Cytion 300270)
- Daňové identifikační číslo NCBI
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_VL14
- Vkladatel
- Ellenbergova laboratoř (EMBL)
05Exprese a náchylnost
- Produkty
- EGFP (zesílený zelený fluorescenční protein)
06Manipulace a chov
- Pěstovací médium
- DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
- Inkubační atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplňky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS
- Disociační činidlo
- Accutase
- Subkultivace
- Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
- Obnova tekutin
- 2 až 3krát týdně
- Rozmrazování a kultivace
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kontrola kvality a kryokonzervace
- Sterilita
Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.
Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.
- Mrazicí médium
- Jako kryokonzervační médium používáme kompletní růstové médium (včetně FBS) + 10 % DMSO pro zajištění dostatečné životaschopnosti po rozmrazení nebo CM-1 (katalogové číslo 800100 společnosti Cytion), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu způsobeného kryo.
- Podmínky skladování
Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.
- Dopravní podmínky
Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.
08Dárce
- Věk dárce
- 30 let
- Etnická příslušnost
- Afroameričan
09Právní informace a bezpečnostní pokyny
- Bezpečnostní opatření
- Při plánování uložení kryovialu v kapalném dusíku pro budoucí rozmrazení je nutné dodržovat přísná bezpečnostní opatření. Nezbytné jsou vhodné ochranné rukavice a oděv a při přenášení zmrazených vzorků do nádrže s kapalným dusíkem nebo z ní je nutné používat obličejovou masku nebo ochranné brýle. To proto, aby se snížilo riziko zranění v důsledku možných výbuchů kryovialů při jejich vyjímání, které mohou mít za následek vystřelování ostrých úlomků.
- Záruka
Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu
Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení
- Platí smlouvy s třetími stranami
- Ano