Pereiti prie turinio
GL-261-Luc
Audinys
Smegenys
Liga
Glioblastoma

Dokumentai

GL-261-Luc

Cell line · Prekės numeris 305662

GL261-Luc cells are a bioluminescent derivative of the murine GL261 glioma cell line engineered to stably express a luciferase reporter gene. Following ad...

€800.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

GL261-Luc ląstelės yra pelių GL261 gliomos ląstelių linijos bioliuminescencinis variantas, modifikuotas taip, kad stabiliai ekspresuotų liuciferazės reporterinį geną. Įvedus liuciferino substratą, šios ląstelės skleidžia kiekybiškai įvertinamą liuminescencinį signalą, proporcingą gyvybingų naviko ląstelių skaičiui, o tai leidžia jautriai ir neinvaziniu būdu stebėti naviko augimą bei reakciją į gydymą. GL261-Luc ląstelės išlaiko daugelį biologinių ir imunogeninių savybių, būdingų pirminiam GL261 gliomos modeliui, įskaitant agresyvų augimą ir suderinamumą su singeninių imunokompetentingų pelių modeliais. Kadangi pirminė GL261 linija kilusi iš pelių gliomos, GL261-Luc ląstelės yra ypač vertingos glioblastomos biologijos tyrimams nepažeistos imuninės sistemos sąlygomis.

GL261-Luc ląstelės plačiai naudojamos ortotopiniuose intrakranialiniuose ir poodiniuose gliomos modeliuose ilgalaikiam in vivo bioluminescenciniam vaizdavimui. Stabili liuciferazės ekspresija leidžia realiuoju laiku įvertinti naviko susidarymą, progresavimą, invaziją, recidyvą ir reakciją į gydymą, nereikalaujant invazinių procedūrų įvairiais laiko momentais. Šios ląstelės plačiai taikomos ikiklinikiniuose neuroonkologijos tyrimuose, kuriuose vertinami chemoterapiniai vaistai, spindulinė terapija, imuninių kontrolės taškų blokada, CAR-T ląstelių terapijos, vėžio vakcinos, onkoliziniai virusai ir nanodalelių pagrindu sukurtos vaistų pristatymo sistemos. In vitro GL261-Luc ląstelės taip pat tinka gyvybingumo tyrimams, citotoksiškumo testavimui, migracijos ir invazijos tyrimams bei didelio našumo terapinių vaistų atrankos procesams, naudojant liuminescencinius rodmenis.

Kaip singeninis gliomos modelis, GL261-Luc ląstelės yra ypač svarbios tiriant naviko ir imuninės sistemos sąveiką, neurouždegimą ir imuninio išvengimo mechanizmus glioblastomos mikroaplinkoje. Tačiau liuciferazės vektorių sistemos, promotorių konfigūracijos ir atrankos strategijos gali skirtis tarp nepriklausomai sukurtų variantų, o tai gali turėti įtakos signalo intensyvumui ir ilgalaikiam reporterio stabilumui. Todėl prieš naudojant kiekybiniams vaizdinimo tyrimams ar terapiniam vertinimui, tyrėjai turėtų patvirtinti liuciferazės aktyvumą, augimo kinetiką ir imunologines charakteristikas savo konkrečiomis eksperimentinėmis sąlygomis.

Audinys
Smegenys
Liga
Glioblastoma

02Klasifikacija

Organizmas
Pele
Augimo savybės
Prisijungęs
GMO statusas
GMO-S1
Išsami informacija apie GMO statusą
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biologinio saugumo lygis
1

03Identifikatoriai

Nuoroda
GL-261-Luc (Cytion katalogo numeris 305662)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10090
Cellosaurus
CVCL_C9CB

04Išraiška ir jautrumas

Antigeno ekspresija
Luc2 (vabalas, kodonų optimizuotas)

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Sėjos tankis
1–3 x 104 ląstelės/cm2
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Veislė / porūšis
C57BL/6