Przejdź do treści
GL-261-Luc
Chusteczka
Mózg
Choroba
Glejak wielopostaciowy

Dokumenty

GL-261-Luc

Cell line · Numer produktu 305662

GL261-Luc cells are a bioluminescent derivative of the murine GL261 glioma cell line engineered to stably express a luciferase reporter gene. Following ad...

€800.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Komórki GL261-Luc stanowią bioluminescencyjną odmianę mysiej linii komórkowej glejaka GL261, zmodyfikowaną genetycznie w celu stabilnej ekspresji genu reporterowego lucyferazy. Po podaniu substratu lucyferyny komórki te emitują mierzalny sygnał luminescencyjny proporcjonalny do liczby żywych komórek nowotworowych, co umożliwia czułe i nieinwazyjne monitorowanie wzrostu guza oraz odpowiedzi na leczenie. Komórki GL261-Luc zachowują wiele właściwości biologicznych i immunogennych macierzystego modelu glejaka GL261, w tym agresywne zachowanie wzrostowe oraz kompatybilność z syngenicznymi modelami myszy z prawidłową odpornością. Ponieważ macierzysta linia GL261 pochodzi z mysiego glejaka, komórki GL261-Luc są szczególnie cenne w badaniach nad biologią glejaka wielopostaciowego w kontekście nienaruszonego układu odpornościowego.

Komórki GL261-Luc są szeroko stosowane w ortotopowych modelach glejaka śródczaszkowego i podskórnego do długoterminowego obrazowania bioluminescencyjnego in vivo. Stabilna ekspresja lucyferazy umożliwia ocenę w czasie rzeczywistym powstawania guza, jego progresji, inwazji, nawrotów oraz odpowiedzi na terapię bez konieczności wykonywania inwazyjnych procedur w wielu punktach czasowych. Komórki te są szeroko stosowane w przedklinicznych badaniach neuroonkologicznych oceniających chemioterapię, radioterapię, blokadę punktów kontrolnych układu odpornościowego, terapie komórkami CAR-T, szczepionki przeciwnowotworowe, wirusy onkolityczne oraz systemy dostarczania leków oparte na nanocząsteczkach. In vitro komórki GL261-Luc nadają się również do testów żywotności, badań cytotoksyczności, badań migracji i inwazji oraz wysokoprzepustowych procesów przesiewowych terapii z wykorzystaniem odczytów opartych na luminescencji.

Jako syngeniczny model glejaka, komórki GL261-Luc są szczególnie ważne w badaniu interakcji między nowotworem a układem odpornościowym, neurozapaleniu oraz mechanizmach unikania odpowiedzi immunologicznej w mikrośrodowisku glejaka wielopostaciowego. Jednak systemy wektorów lucyferazy, konfiguracje promotorów i strategie selekcji mogą się różnić między niezależnie wygenerowanymi wariantami, co może potencjalnie wpływać na intensywność sygnału i długoterminową stabilność reporterów. Dlatego przed wykorzystaniem w badaniach obrazowania ilościowego lub ocenie terapeutycznej naukowcy powinni zweryfikować aktywność lucyferazy, kinetykę wzrostu i cechy immunologiczne w swoich konkretnych warunkach eksperymentalnych.

Chusteczka
Mózg
Choroba
Glejak wielopostaciowy

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Identyfikatory

Źródło
GL-261-Luc (numer katalogowy Cytion 305662)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_C9CB

04Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
Luc2 (świetlik, zoptymalizowany pod kątem kodonów)

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Gęstość wysiewu
1 do 3 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Rasa / podgatunek
C57BL/6