HFF-1

HFF-1 yra žmogaus apyvarpės fibroblastų ląstelių linija, dažnai naudojama kaip maitinamasis sluoksnis žmogaus embrioninėms kamieninėms ląstelėms (hESC) ir indukuotoms pluripotentinėms kamieninėms ląstelėms (iPSC) auginti. HFF-1 ląstelės, gautos iš naujagimių odos audinio, aprūpina pagrindiniais ekstraląstelinio matrikso komponentais ir išskiria pagrindines signalines molekules, kurios skatina hESC prisitvirtinimą ir iš dalies palaiko jų pluripotentinę būseną. Šių fibroblastų raiška buvo įvertinta dėl kelių pluripotenciją palaikančių augimo veiksnių, įskaitant TGFβ1, aktyviną A ir 2 fibroblastų augimo veiksnį (FGF-2), nors jų, kaip maitinamųjų ląstelių, efektyvumas gali skirtis priklausomai nuo konkrečios linijos ir auginimo sąlygų.

Atliekant lyginamuosius tyrimus, žmogaus apyvarpės fibroblastai, tokie kaip HFF-1, išskiria aptinkamus FGF-2 ir aktyvino A kiekius, nors jų sekrecijos lygis paprastai yra mažesnis nei pelių embrioninių fibroblastų. HFF-1 ląstelės taip pat ekspresuoja BMP-4 mRNA ir baltymą, nors BMP-4 dimerų sekrecijos lygis yra labai žemas ir dažnai neaptinkamas kondicionuojamoje terpėje, greičiausiai dėl viduląstelinės sekvestracijos arba slopinimo gremlinu. Svarbu tai, kad HFF-1 augimo veiksnių sekreciją keičia mitozinis inaktyvinimas (pvz., gydymas mitomicinu C) ir terpės sudėtis (pvz., "KnockOut Serum Replacement" ir fetalinis galvijų serumas). HFF-1 ląstelių gebėjimas palaikyti nediferencijuotų hESC augimą koreliuoja su jų išskiriamu aktyvinu A ir TGFβ1, nors papildymas egzogeniniu aktyvinu A gali pagerinti pluripotencijos žymenų, tokių kaip SSEA3, palaikymą, kai šios ląstelės naudojamos kaip maitintojos.

Apskritai HFF-1 yra naudingas žmogaus kilmės maitinamųjų ląstelių modelis kamieninių ląstelių kultūrų sistemoms, kuriomis siekiama sumažinti ksenokomponentų kiekį. Tačiau jų gebėjimas palaikyti ilgalaikes nediferencijuotas hESC kultūras paprastai laikomas mažiau patikimu nei pelių kilmės maitinamųjų ląstelių, nebent jos būtų papildytos specifiniais augimo veiksniais. Tačiau dėl jų žmogiškosios kilmės jos tampa ypač patrauklios klinikinėms ir transliacinėms kamieninių ląstelių programoms, kuriose būtina užtikrinti sąlygas be ksenogenų.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime