HFF-1

HFF-1 on inimese eesnaha fibroblastide rakuliin, mida kasutatakse sageli inimese embrüonaalsete tüvirakkude (hESC) ja indutseeritud pluripotentsete tüvirakkude (iPSC) kasvatamisel. HFF-1 rakud on saadud vastsündinu nahakudusest, nad annavad olulisi rakuvälise maatriksi komponente ja eritavad olulisi signaalimolekule, mis soodustavad hESC-i kinnitumist ja toetavad osaliselt nende pluripotentset seisundit. Nende fibroblastide puhul on hinnatud mitmete pluripotentsust toetavate kasvufaktorite, sealhulgas TGFβ1, aktiviin A ja fibroblastide kasvufaktor 2 (FGF-2) ekspressiooni, kuigi nende tõhusus toitmisrakkudena võib erineda sõltuvalt konkreetsest liinist ja kasvatustingimustest.

Võrdlevates uuringutes on inimese eesnaha fibroblastid, nagu HFF-1, eritavad tuvastatavat FGF-2 ja activin A taset, kuigi nende sekretsiooni tase on üldiselt madalam kui hiirte embrüonaalsete fibroblastide puhul täheldatud. HFF-1 rakud ekspresseerivad ka BMP-4 mRNAd ja valku, kuigi BMP-4 dimeeride sekretsiooni tase on äärmiselt madal ja sageli konditsioneeritud meediumis tuvastamatu, tõenäoliselt rakusisese sekvestratsiooni või gremliini poolt põhjustatud inhibeerimise tõttu. Oluline on, et kasvufaktorite sekretsiooni HFF-1 poolt moduleerib mitootiline inaktiveerimine (nt mitomütsiin C-töötlus) ja meediumi koostis (nt KnockOut-seerumi asendamine vs. veiste loote seerum). HFF-1 rakkude võime toetada diferentseerimata hESC kasvu korreleerub nende aktiviin A ja TGFβ1 sekretsiooniga, kuigi eksogeense aktiviin A lisamine võib parandada pluripotentsuse markerite, nagu SSEA3, säilitamist, kui neid rakke kasutatakse söötjana.

Kokkuvõttes on HFF-1 kasulik inimtoidurakkude mudel tüvirakkude kasvatussüsteemides, mille eesmärk on vähendada ksenokomponente. Siiski peetakse nende võimet säilitada pikaajalisi diferentseerimata hESC-kultuure üldiselt vähem tugevaks kui hiirtest saadud toitjarakkude puhul, kui neid ei kombineerita spetsiifiliste kasvufaktorite lisamisega. Nende inimpäritolu muudab need siiski eriti atraktiivseks kliiniliste ja translatsiooniliste tüvirakkude rakenduste jaoks, kus ksenovabad tingimused on olulised.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest