HFF-1

HFF-1 هو خط خلايا الخلايا الجذعية الليفية القشرية البشرية (HFF-1) الذي يُستخدم بشكل متكرر كطبقة مغذية لزراعة الخلايا الجذعية الجنينية البشرية (hESCs) والخلايا الجذعية المستحثة متعددة القدرات (iPSCs). توفر خلايا HFF-1، المشتقة من الأنسجة الجلدية لحديثي الولادة، مكونات مصفوفة خارج الخلية الأساسية وتفرز جزيئات الإشارات الرئيسية التي تعزز ارتباط الخلايا الجذعية الجنينية المستحدثة متعددة القدرات وتدعم جزئياً حالتها متعددة القدرات. وقد تم تقييم هذه الخلايا الليفية من حيث تعبيرها عن العديد من عوامل النمو الداعمة لتعدد القدرات، بما في ذلك TGFβ1 وA Activin A وعامل نمو الأرومة الليفية 2 (FGF-2)، على الرغم من أن فعاليتها كخلايا مغذية يمكن أن تختلف اعتماداً على الخط المحدد وظروف الاستزراع.

في الدراسات المقارنة، تفرز الخلايا الليفية القشرية البشرية مثل HFF-1 مستويات يمكن اكتشافها من FGF-2 و Activin A، على الرغم من أن مستويات إفرازها أقل بشكل عام من تلك التي لوحظت في الخلايا الليفية الجنينية للفأر. تعبر خلايا HFF-1 أيضًا عن الحمض النووي الريبوزي المرسال والبروتين BMP-4، على الرغم من أن مستويات إفراز ثنائيات BMP-4 المفرزة منخفضة للغاية وغالبًا ما تكون غير قابلة للكشف في الوسائط المكيفة، ويرجع ذلك على الأرجح إلى الاحتجاز داخل الخلايا أو تثبيطها بواسطة الغريملين. والأهم من ذلك، يتم تعديل إفراز عوامل النمو بواسطة HFF-1 عن طريق التعطيل الانقسامي (على سبيل المثال، المعالجة بالميتوميسين C) وتكوين الوسائط (على سبيل المثال، استبدال مصل KnockOut Serum مقابل مصل البقر الجنيني). وترتبط قدرة خلايا HFF-1 على دعم نمو الخلايا الجذعية المستقرة غير المتمايزة مع إفرازها لـ Activin A و TGFβ1، على الرغم من أن المكملات مع Activin A الخارجية يمكن أن تحسن الحفاظ على علامات تعدد القدرات مثل SSEA3 عند استخدام هذه الخلايا كمغذيات.

وبشكل عام، تُستخدم خلايا HFF-1 كنموذج مفيد للخلايا المغذية المشتقة من الإنسان لأنظمة زراعة الخلايا الجذعية التي تهدف إلى الحد من المكونات الغريبة. ومع ذلك، تعتبر قدرتها على الحفاظ على مزارع الخلايا الجذعية البشرية غير المتمايزة على المدى الطويل أقل قوة من الخلايا المغذية المشتقة من الفأر بشكل عام ما لم تقترن بمكملات عوامل نمو محددة. ومع ذلك، فإن أصلها البشري يجعلها جذابة بشكل خاص لتطبيقات الخلايا الجذعية السريرية والانتقالية حيث تكون الظروف الخالية من العناصر الغريبة ضرورية.

37 درجة مئوية، و5% من _ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

في Cytion، نلتزم في Cytion بجودة منتجاتنا وحيويتها. نحن نضمن أن تكون خلايانا قابلة للحياة في بداية الاستزراع لمدة 60 يومًا بعد الشحن من منشآتنا. نؤكد أن جميع المواد مطابقة للمواصفات الموضحة في شهادة التحليل و/أو ورقة المنتج

للحصول على التفاصيل الكاملة، يُرجى الرجوع إلى <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">بيان الضمان