HFF-1

HFF-1 הוא קו תאים פיברובלסטיים של עורלת אדם המשמש לעתים קרובות כשכבת הזנה לגידול תאי גזע עובריים אנושיים (hESCs) ותאי גזע פלוריפוטנטיים מושרים (iPSCs). תאי HFF-1, המופקים מרקמת עור של יילודים, מספקים רכיבים חיוניים למטריקס החוץ-תאי ומפרישים מולקולות איתות מרכזיות המקדמות את היצמדות תאי hESC ותומכות באופן חלקי במצבם הפלוריפוטנטי. פיברובלסטים אלה נבדקו על ביטוי של מספר גורמי גדילה התומכים בפלוריפוטנטיות, כולל TGFβ1, אקטיבין A ופקטור גדילה פיברובלסטי 2 (FGF-2), אם כי יעילותם כתאי הזנה עשויה להשתנות בהתאם לקו הספציפי ולתנאי התרבית.

במחקרים השוואתיים, פיברובלסטים של עורלת אדם כמו HFF-1 מפרישים רמות ניתנות לזיהוי של FGF-2 ו-activin A, אם כי רמות ההפרשה שלהם נמוכות בדרך כלל מאלה שנצפו בפיברובלסטים עובריים של עכברים. תאי HFF-1 מבטאים גם mRNA ו-BMP-4 חלבון, אם כי רמות ההפרשה של דימרים BMP-4 נמוכות ביותר ולעתים קרובות אינן ניתנות לזיהוי במדיום מותנה, ככל הנראה עקב הסגר תאי או עיכוב על ידי גרמלין. חשוב לציין כי הפרשת גורמי הגדילה על ידי HFF-1 מווסתת על ידי איון מיטוטי (למשל, טיפול במיטומיצין C) והרכב התקשורת (למשל, תחליף סרום KnockOut לעומת סרום עגלי). היכולת של תאי HFF-1 לתמוך בצמיחת hESC בלתי מובחנת מתואמת עם הפרשת activin A ו-TGFβ1, אם כי תוספת של activin A אקסוגני יכולה לשפר את שמירת סמני הפלוריפוטנטיות כגון SSEA3 כאשר תאים אלה משמשים כמזינים.

בסך הכל, HFF-1 משמשים כמודל שימושי של תאי מזון שמקורם בבני אדם עבור מערכות תרבית תאי גזע שמטרתן להפחית את רכיבי הזנו. עם זאת, יכולתם לשמור על תרבית hESC בלתי מובחנת לטווח ארוך נחשבת בדרך כלל לפחות חזקה מזו של תאי מזון שמקורם בעכברים, אלא אם כן הם משולבים עם תוספת של גורמי גדילה ספציפיים. מקורם האנושי, עם זאת, הופך אותם לאטרקטיביים במיוחד עבור יישומים קליניים ותרגומיים של תאי גזע, שבהם תנאים נטולי זנו הם חיוניים.

37°C, 5%_CO2, אווירה לחה.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

ב-Cytion, אנו עומדים מאחורי האיכות והכדאיות של המוצרים שלנו. אנו מבטיחים שתאינו יהיו קיימים בתחילת התרבית למשך 60 יום לאחר המשלוח מהמתקנים שלנו. אנו מבטיחים שכל החומרים תואמים למפרטים המתוארים בתעודת הניתוח ו/או בדף המוצר.

לפרטים מלאים, אנא עיינו ב <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">הצהרת האחריות שלנו