HFF-1

HFF-1は、ヒト胚性幹細胞（hESC）や人工多能性幹細胞（iPSC）の培養のためのフィーダー層として頻繁に用いられるヒト包皮線維芽細胞株である。新生児の真皮組織に由来するHFF-1細胞は、必須細胞外マトリックス成分を供給し、hESCの接着を促進し、その多能性状態を部分的に支持する重要なシグナル伝達分子を分泌する。これらの線維芽細胞は、TGFβ1、アクチビンA、線維芽細胞増殖因子2（FGF-2）など、多能性を支持する増殖因子の発現について評価されているが、フィーダー細胞としての有効性は、特定の株や培養条件によって異なる可能性がある。

比較研究において、HFF-1のようなヒト包皮線維芽細胞は、検出可能なレベルのFGF-2とアクチビンAを分泌するが、その分泌レベルは一般にマウス胚線維芽細胞で観察されるレベルより低い。HFF-1細胞はBMP-4 mRNAとタンパク質も発現しているが、BMP-4二量体の分泌レベルは極めて低く、条件培地中ではしばしば検出されない。重要なことは、HFF-1による成長因子の分泌は、有糸分裂の不活性化（例えば、マイトマイシンC処理）と培地組成（例えば、ノックアウト血清置換対ウシ胎児血清）によって調節されることである。HFF-1細胞が未分化hESCの成長をサポートする能力は、アクチビンAおよびTGFβ1の分泌と相関しているが、これらの細胞をフィーダーとして使用する場合、外因性アクチビンAを補充することで、SSEA3などの多能性マーカーの維持を改善することができる。

全体として、HFF-1は、異種成分の減少を目指す幹細胞培養系にとって有用なヒト由来フィーダー細胞モデルである。しかし、HFF-1の未分化なhESC培養を長期間維持する能力は、特定の成長因子を補充しない限り、一般にマウス由来のフィーダー細胞より劣ると考えられている。しかしながら、ヒト由来であることから、ゼノ成分を含まないことが必須である臨床幹細胞やトランスレーショナル幹細胞への応用には特に魅力的である。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。