HFF-1

HFF-1 adalah garis sel fibroblas kulup manusia yang sering digunakan sebagai lapisan pengumpan untuk kultur sel punca embrionik manusia (hESC) dan sel punca pluripoten yang diinduksi (iPSC). Berasal dari jaringan kulit neonatal, sel HFF-1 menyediakan komponen matriks ekstraseluler yang penting dan mengeluarkan molekul pensinyalan utama yang mendorong perlekatan hESC dan sebagian mendukung kondisi pluripotensialnya. Fibroblas ini telah dievaluasi untuk ekspresi beberapa faktor pertumbuhan yang mendukung pluripotensi, termasuk TGFβ1, aktivin A, dan faktor pertumbuhan fibroblas 2 (FGF-2), meskipun keefektifannya sebagai sel pengumpan dapat bervariasi tergantung pada garis dan kondisi kultur tertentu.

Dalam studi komparatif, fibroblas kulup manusia seperti HFF-1 mengeluarkan tingkat FGF-2 dan aktivin A yang dapat dideteksi, meskipun tingkat sekresi mereka umumnya lebih rendah daripada yang diamati pada fibroblas embrionik tikus. Sel HFF-1 juga mengekspresikan mRNA dan protein BMP-4, meskipun tingkat dimer BMP-4 yang disekresikan sangat rendah dan sering tidak terdeteksi dalam media yang dikondisikan, kemungkinan karena penyerapan intraseluler atau penghambatan oleh gremlin. Yang penting, sekresi faktor pertumbuhan oleh HFF-1 dimodulasi oleh inaktivasi mitosis (misalnya, pengobatan mitomisin C) dan komposisi media (misalnya, Penggantian Serum KnockOut vs serum sapi janin). Kemampuan sel HFF-1 untuk mendukung pertumbuhan hESC yang tidak berdiferensiasi berkorelasi dengan sekresi aktivin A dan TGFβ1, meskipun suplementasi dengan aktivin A eksogen dapat meningkatkan pemeliharaan penanda pluripotensi seperti SSEA3 ketika sel-sel ini digunakan sebagai pengumpan.

Secara keseluruhan, HFF-1 berfungsi sebagai model sel pengumpan yang berasal dari manusia yang berguna untuk sistem kultur sel punca yang bertujuan untuk mengurangi komponen xeno. Namun, kapasitasnya untuk mempertahankan kultur hESC yang tidak berdiferensiasi dalam jangka panjang umumnya dianggap kurang kuat dibandingkan dengan sel pengumpan yang berasal dari tikus kecuali jika dikombinasikan dengan suplementasi faktor pertumbuhan tertentu. Akan tetapi, asal usulnya dari manusia membuat mereka sangat menarik untuk aplikasi sel punca klinis dan translasi yang membutuhkan kondisi bebas xeno.

37°C, 5%_CO2, atmosfer yang dilembabkan.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk

Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami