HFF-1

HFF-1 เป็นสายพันธุ์เซลล์ไฟโบรบลาสต์จากหนังหุ้มปลายอวัยวะเพศชายของมนุษย์ ซึ่งมักใช้เป็นชั้นอาหารเลี้ยงเซลล์สำหรับการเพาะเลี้ยงเซลล์ต้นกำเนิดจากตัวอ่อนมนุษย์ (hESCs) และเซลล์ต้นกำเนิดแบบเหนี่ยวนำ (iPSCs) เซลล์ HFF-1 ซึ่งสกัดจากเนื้อเยื่อผิวหนังของทารกแรกเกิด ให้องค์ประกอบของเมทริกซ์นอกเซลล์ที่จำเป็นและหลั่งโมเลกุลสัญญาณสำคัญที่ส่งเสริมการยึดเกาะของ hESC และช่วยสนับสนุนสภาวะความเป็นเซลล์ต้นกำเนิดแบบอเนกประสงค์บางส่วนไฟโบรบลาสต์เหล่านี้ได้รับการประเมินการแสดงออกของปัจจัยการเจริญเติบโตที่สนับสนุนความหลากหลายหลายชนิดหลายชนิด รวมถึง TGFβ1, activin A, และไฟโบรบลาสต์การเจริญเติบโตปัจจัย 2 (FGF-2) แม้ว่าประสิทธิภาพของพวกมันในฐานะเซลล์ฟีดเดอร์อาจแตกต่างกันไปขึ้นอยู่กับสายพันธุ์และสภาพการเพาะเลี้ยงที่เฉพาะเจาะจง

ในการศึกษาเปรียบเทียบ พบว่าไฟโบรบลาสต์จากหนังหุ้มปลายองคชาตของมนุษย์ เช่น HFF-1 ผลิต FGF-2 และ activin A ในระดับที่สามารถตรวจพบได้ แม้ว่าการผลิตของสารเหล่านี้จะต่ำกว่าที่พบในไฟโบรบลาสต์จากตัวอ่อนของหนูก็ตามเซลล์ HFF-1 ยังแสดงออกของ BMP-4 mRNA และโปรตีน แม้ว่าปริมาณ BMP-4 ไดเมอร์ที่ถูกหลั่งออกมาจะต่ำมากและมักไม่สามารถตรวจพบได้ในมีเดียที่ผ่านการบ่มแล้ว ซึ่งน่าจะเกิดจากการกักเก็บภายในเซลล์หรือการยับยั้งโดย gremlinที่สำคัญ การหลั่งของปัจจัยการเจริญเติบโตโดย HFF-1 ถูกปรับโดยกระบวนการยับยั้งการแบ่งเซลล์ (เช่น การรักษาด้วย mitomycin C) และองค์ประกอบของอาหารเลี้ยงเซลล์ (เช่น KnockOut Serum Replacement เทียบกับ fetal bovine serum)ความสามารถของเซลล์ HFF-1 ในการสนับสนุนการเจริญเติบโตของ hESC ที่ยังไม่แยกตัวมีความสัมพันธ์กับการหลั่ง activin A และ TGFβ1 ของเซลล์เหล่านี้ แม้ว่า การเสริม activin A จากภายนอกสามารถปรับปรุงการรักษาตัวบ่งชี้ความเป็น pluripotent เช่น SSEA3 เมื่อเซลล์เหล่านี้ถูกใช้เป็นเซลล์ฟีดเดอร์

โดยรวมแล้ว HFF-1 ทำหน้าที่เป็นแบบจำลองเซลล์ป้อนอาหารที่ได้จากมนุษย์ซึ่งมีประโยชน์สำหรับระบบเพาะเลี้ยงเซลล์ต้นกำเนิดที่มุ่งลดส่วนประกอบจากสัตว์ อย่างไรก็ตาม ความสามารถในการรักษาการเพาะเลี้ยง hESC ที่ไม่ถูกแยกตัวในระยะยาวนั้นโดยทั่วไปถือว่ามีความทนทานน้อยกว่าเซลล์ป้อนอาหารที่ได้จากหนู เว้นแต่จะเสริมด้วยปัจจัยการเจริญเติบโตเฉพาะ อย่างไรก็ตาม ต้นกำเนิดจากมนุษย์ทำให้เซลล์เหล่านี้มีความน่าสนใจเป็นพิเศษสำหรับการประยุกต์ใช้เซลล์ต้นกำเนิดในทางคลินิกและการแปลผลซึ่งจำเป็นต้องปราศจากส่วนประกอบจากสัตว์

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.