Pāriet uz saturu
Caov-3
Audums
Olnīcas
Slimība
Augstas pakāpes olnīcu serozā adenokarcinoma
Sinonīmi
CaOv-3, CaOV-3, CAOV-3, CAOV3, CaOV3, CaOv3, Caov3, CA-OV-3

Dokumenti

Caov-3

Cell line · Preces numurs 300319

Caov-3 cells are derived from the ovary of a 54-year-old Caucasian woman with adenocarcinoma, provide researchers with a representative model for high-gra...

€650.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

Caov-3 šūnas, kas iegūtas no 54 gadus vecas baltādainas sievietes olnīcas ar adenokarcinomu, pētniekiem nodrošina reprezentatīvu augstas pakāpes olnīcu vēža modeli. Šūnu līnija tika izveidota 1976. gadā, un kopš tā laika ir izmantota daudzos pētījumos.

Caov-3 šūnas ar savu epitēlija morfoloģiju ļoti līdzinās olnīcu vēža primāro šūnu īpašībām. Kultivējot šīs šūnas veido blīvas kolonijas, kas imitē cilvēka organismā novēroto uzvedību. To unikālās īpašības padara tās par ideālu izvēli pētniekiem, kas pēta olnīcu vēža šūnu augšanu, uzvedību un reakciju.

Svarīgs atklājums šajā jomā ir all-trans retinoīnskābes ietekme uz Caov-3 šūnām. Pētījumi liecina, ka šis savienojums nomāc šo olnīcu vēža šūnu augšanu in vitro. Turklāt Caov-3 šūnas ekspresē dažādus ar audzēju saistītus antigēnus, tostarp NB/70K, CA-125, Ba-2 un Ca-1, kas palielina to lietderību mērķterapijas un imūnterapijas pētījumos.

Caov-3 šūnu genomā ir būtiskas anomālijas, kas izskaidro to audzēja īpašības. Piemēram, šajās šūnās ir nonsensa mutācija audzēju nomācošajā gēnā p53, un tām ir vairākas olnīcu vēža onkogēna PIK3CA kopijas, kam ir būtiska nozīme vēža attīstībā un progresēšanā. Attiecībā uz jutību pret zālēm Caov-3 šūnas reaģē uz vairākiem plaši izmantotiem ķīmijterapeitiskiem līdzekļiem.

Ir pierādīts, ka uz šīm šūnām iedarbojas vinblastīns, cisplatīns un adriamicīns. Vēl viena Caov-3 šūnu īpašība ir to uzvedība dažādos kultūras apstākļos. Lai gan šīs šūnas neaug mīkstā agārā, tām piemīt audzēja īpašības, ja tās injicē imūnkompromitētām pelēm. Tāpēc no to daudzajiem pielietojumiem pētniecībā Caov-3 šūnas ir īpaši piemērotas 3D šūnu kultūru eksperimentiem.

Pateicoties to epitēlija morfoloģijai un spējai veidot blīvas kolonijas, tās ir ideāla izvēle šūnu un šūnu mijiedarbības, audu organizācijas un olnīcu vēža šūnu uzvedības izpētei fizioloģiski piemērotākā vidē. Tomēr, plānojot eksperimentus, jāņem vērā ilgais dubultošanās laiks - aptuveni 78 stundas.

Audums
Olnīcas
Slimība
Augstas pakāpes olnīcu serozā adenokarcinoma
Sinonīmi
  • CaOv-3
  • CaOV-3
  • CAOV-3
  • CAOV3
  • CaOV3
  • CaOv3
  • Caov3
  • CA-OV-3

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs

04Identifikatori

Atsauce
Caov-3 (Cytion kataloga numurs 300319)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0201

05Pazīmes un uzņēmība

Izoenzīmi
AK-1, 1, ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 1-2, Me-2, 2, PGM1, 1, PGM3, 1

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
TrypLE Express 10 min 37 °C temperatūrā
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
54 gadi
Etniskā piederība
Eiropas