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Caov-3
Tecido
Ovário
Doença
Adenocarcinoma seroso do ovário de alto grau
Sinónimos
CaOv-3, CaOV-3, CAOV-3, CAOV3, CaOV3, CaOv3, Caov3, CA-OV-3

Documentos

Caov-3

Cell line · Número do produto 300319

Caov-3 cells are derived from the ovary of a 54-year-old Caucasian woman with adenocarcinoma, provide researchers with a representative model for high-gra...

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01Informações gerais

Descrição

As células Caov-3 são derivadas do ovário de uma mulher caucasiana de 54 anos com adenocarcinoma e fornecem aos investigadores um modelo representativo do cancro do ovário de alto grau. A linha celular foi criada em 1976 e, desde então, tem sido utilizada em numerosos estudos.

Com a sua morfologia epitelial, as células Caov-3 assemelham-se muito às caraterísticas das células primárias do cancro do ovário. Quando cultivadas, estas células formam colónias densamente compactadas que imitam o comportamento observado no corpo humano. As suas propriedades únicas fazem delas a escolha ideal para os investigadores que estudam o crescimento, o comportamento e a resposta das células cancerígenas do ovário.

Uma descoberta importante neste domínio é o efeito do ácido all-trans retinóico nas células Caov-3. Estudos demonstraram que este composto suprime o crescimento destas células cancerosas do ovário in vitro. Além disso, as células Caov-3 expressam vários antigénios associados a tumores, incluindo NB/70K, CA-125, Ba-2 e Ca-1, o que aumenta a sua utilidade para a investigação de terapias e imunoterapias específicas.

O genoma das células Caov-3 apresenta anomalias significativas que explicam as suas propriedades tumorigénicas. Por exemplo, estas células têm uma mutação sem sentido no gene supressor de tumores p53 e possuem múltiplas cópias do oncogene PIK3CA do cancro do ovário, que desempenha um papel crítico no desenvolvimento e progressão do cancro. Em termos de sensibilidade aos fármacos, as células Caov-3 respondem a vários agentes quimioterapêuticos comummente utilizados.

Foi demonstrado que a vinblastina, a cisplatina e a adriamicina têm efeito nestas células. Outra caraterística das células Caov-3 é o seu comportamento em diferentes condições de cultura. Embora estas células não cresçam em ágar mole, exibem propriedades tumorigénicas quando injectadas em ratos imunocomprometidos. Por conseguinte, entre as suas muitas aplicações na investigação, as células Caov-3 são particularmente adequadas para experiências de cultura de células 3D.

Devido à sua morfologia epitelial e capacidade de formar colónias densas, são a escolha ideal para estudar as interações célula-célula, a organização dos tecidos e o comportamento das células cancerígenas do ovário num ambiente fisiologicamente mais relevante. No entanto, o longo tempo de duplicação de aproximadamente 78 horas deve ser considerado na conceção experimental.

Tecido
Ovário
Doença
Adenocarcinoma seroso do ovário de alto grau
Sinónimos
  • CaOv-3
  • CaOV-3
  • CAOV-3
  • CAOV3
  • CaOV3
  • CaOv3
  • Caov3
  • CA-OV-3

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial

04Identificadores

Referência
Caov-3 (número de catálogo Cytion 300319)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0201

05Expressão e suscetibilidade

Isoenzimas
AK-1, 1, ES-D, 1, G6PD, B, GLO-I, 1-2, Me-2, 2, PGM1, 1, PGM3, 1

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
TrypLE Express 10 min a 37°C
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
54 anos
Etnia
Europeu