Pāriet uz saturu
U-251 MG
Audums
Smadzenes
Slimība
Astrocitoma
Sinonīmi
U-251MG, U-251-MG, U-251_MG, U251-MG, U251MG, U-251, U251, U251n, U251N, 251 MG, 251MG

Dokumenti

U-251 MG

Cell line · Preces numurs 300385

The U-251 MG cell line is a well-characterized human glioblastoma multiforme (GBM) cell line that is extensively used in neuro-oncology research. Derived ...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

U-251 MG šūnu līnija ir labi raksturota cilvēka multiformas glioblastomas (GBM) šūnu līnija, ko plaši izmanto neiroonkoloģiskajos pētījumos. Šī šūnu līnija, kas sākotnēji iegūta no 75 gadus veca kaukāzieša vīrieša, ir bijusi noderīga smadzeņu audzēju pētniecībā, jo īpaši, lai izprastu ļaundabīgo gliomu molekulāros un šūnu mehānismus. U-251 MG šūnām piemīt astrocītiskas īpašības, kas ir raksturīgas to izcelsmei no astrocītiem, kas ir dominējošais šūnu tips, kas iesaistīts GBM.

No ģenētiskā viedokļa U-251 MG šūnās ir mutācijas un izmaiņas, kas raksturīgas augstas pakāpes astrocitomiem, tostarp mutācijas TP53 gēnā un heterozigotiskuma zudums 10. hromosomā, kas ietver PTEN gēnu. Šīs ģenētiskās iezīmes veicina šūnu līnijas lietderību audzēja supresoru gēnu funkciju un šūnu ceļu, kas saistīti ar audzēja progresēšanu un rezistenci, pētniecībā. Šūnas ir pazīstamas arī ar to spēcīgo augšanas ātrumu in vitro un spēju veidot audzējus, kad tās ksenogrāfē imūnkompromitētām pelēm, padarot tās par vērtīgu modeli audzēju augšanas, invazijas un reakcijas uz terapiju pētījumiem in vivo.

Turklāt U-251 MG ir izmantots daudzos pētījumos, kas vērsti uz terapeitiskām pieejām, tostarp ķīmijterapijas rezistenci, staru terapijas rezultātiem un jaunu pretvēža savienojumu novērtēšanu. Tā plašais pielietojums translatoloģiskajos pētījumos uzsver tā nozīmi, lai savienotu neirozinātnes fundamentālos atklājumus ar klīniskajiem pielietojumiem, jo īpaši glioblastomas mērķterapijas izstrādē.

Audums
Smadzenes
Slimība
Astrocitoma
Sinonīmi
  • U-251MG
  • U-251-MG
  • U-251_MG
  • U251-MG
  • U251MG
  • U-251
  • U251
  • U251n
  • U251N
  • 251 MG
  • 251MG

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
24 stundas

04Identifikatori

Atsauce
U-251 MG (Cytion kataloga numurs 300385)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0021

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
GFAP un vimentīna ekspresija

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atgūšanās pēc atkusņa
Ātri, 24 stundu laikā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam 50 % bāzes barotni + 40 % FBS + 10 % DMSO vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu reģenerāciju un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
75 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis