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U-251 MG
Gewebe
Gehirn
Krankheit
Astrozytom
Synonyme
U-251MG, U-251-MG, U-251_MG, U251-MG, U251MG, U-251, U251, U251n, U251N, 251 MG, 251MG

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U-251 MG

Cell line · Artikelnummer 300385

The U-251 MG cell line is a well-characterized human glioblastoma multiforme (GBM) cell line that is extensively used in neuro-oncology research. Derived ...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die U-251 MG-Zelllinie ist eine gut charakterisierte menschliche Glioblastoma-multiforme (GBM)-Zelllinie, die in der neuroonkologischen Forschung weit verbreitet ist. Diese Zelllinie, die ursprünglich von einem 75-jährigen kaukasischen Mann stammt, hat bei der Erforschung von Hirntumoren eine wichtige Rolle gespielt, insbesondere beim Verständnis der molekularen und zellulären Mechanismen, die malignen Gliomen zugrunde liegen. Die U-251 MG-Zellen weisen astrozytäre Eigenschaften auf, die charakteristisch für ihre Herkunft aus Astrozyten sind, dem vorherrschenden Zelltyp bei GBM.

Genetisch weisen die U-251 MG-Zellen Mutationen und Veränderungen auf, die für hochgradige Astrozytome typisch sind, darunter Mutationen im TP53-Gen und ein Verlust der Heterozygotie auf Chromosom 10, das das PTEN-Gen umfasst. Diese genetischen Merkmale tragen zur Nützlichkeit der Zelllinie bei, wenn es um die Untersuchung der Funktionen von Tumorsuppressorgenen und der zellulären Wege geht, die an der Tumorprogression und -resistenz beteiligt sind. Die Zellen sind auch für ihre robusten In-vitro-Wachstumsraten und ihre Fähigkeit bekannt, Tumore zu bilden, wenn sie in immungeschwächte Mäuse xenograftet werden, was sie zu einem wertvollen Modell für In-vivo-Studien über Tumorwachstum, Invasion und Therapieansprechen macht.

Darüber hinaus wurde U-251 MG in einer Vielzahl von Studien eingesetzt, die sich mit therapeutischen Ansätzen befassen, u. a. mit Chemotherapieresistenz, Ergebnissen der Strahlentherapie und der Bewertung neuartiger Krebsmedikamente. Seine umfassende Verwendung in der translationalen Forschung unterstreicht seine Bedeutung für die Verknüpfung grundlegender neurowissenschaftlicher Entdeckungen mit klinischen Anwendungen, insbesondere bei der Entwicklung gezielter Therapien für Glioblastome.

Gewebe
Gehirn
Krankheit
Astrozytom
Synonyme
  • U-251MG
  • U-251-MG
  • U-251_MG
  • U251-MG
  • U251MG
  • U-251
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  • 251 MG
  • 251MG

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
1

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Verdopplungszeit
24 Stunden

04Bezeichner

Quellenangabe
U-251 MG (Cytion Katalognummer 300385)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_0021

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
Ausprägung von GFAP und Vimentin

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Aussaatdichte
1 x 104 Zellen/cm²
Flüssigkeitswechsel
2 bis 3 Mal pro Woche
Erholung nach dem Auftauen
Schnell, innerhalb von 24 Stunden
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir 50 % Basalmedium + 40 % FBS + 10 % DMSO oder CM-1 (Cytion-Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektiva und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und den kryoinduzierten Stress zu verringern.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
75 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Kaukasisch