Přejít na obsah
U-251 MG
Tkáň
Mozek
Nemoc
Astrocytom
Synonyma
U-251MG, U-251-MG, U-251_MG, U251-MG, U251MG, U-251, U251, U251n, U251N, 251 MG, 251MG

Dokumenty

U-251 MG

Cell line · Číslo výrobku 300385

The U-251 MG cell line is a well-characterized human glioblastoma multiforme (GBM) cell line that is extensively used in neuro-oncology research. Derived ...

€550.00bez DPH a poštovného
Skladem
Lot
Doporučeno (nejčerstvější šarže)
  • CoA
1

01Obecné informace

Popis

Buněčná linie U-251 MG je dobře charakterizovaná lidská buněčná linie multiformního glioblastomu (GBM), která se hojně využívá v neuroonkologickém výzkumu. Tato buněčná linie, původně odvozená od 75letého muže kavkazské rasy, se významně podílí na studiu mozkových nádorů, zejména na pochopení molekulárních a buněčných mechanismů, které jsou základem maligních gliomů. Buňky U-251 MG vykazují astrocytární vlastnosti, které jsou charakteristické pro jejich původ z astrocytů, což je převládající typ buněk, které se podílejí na vzniku GBM.

Geneticky se v buňkách U-251 MG vyskytují mutace a změny typické pro astrocytomy vysokého stupně, včetně mutací v genu TP53 a ztráty heterozygozity na chromozomu 10, který zahrnuje gen PTEN. Tyto genetické znaky přispívají k užitečnosti buněčné linie při studiu funkcí nádorových supresorových genů a buněčných drah, které se podílejí na progresi a rezistenci nádorů. Buňky jsou také známé pro svou robustní rychlost růstu in vitro a schopnost vytvářet nádory při xenotransplantaci do imunokompromitovaných myší, což z nich činí cenný model pro studie růstu nádorů, invaze a reakce na léčbu in vivo.

Kromě toho byl U-251 MG použit v mnoha studiích zaměřených na terapeutické přístupy, včetně rezistence na chemoterapii, výsledků radioterapie a hodnocení nových protinádorových sloučenin. Jeho rozsáhlé využití v translačním výzkumu zdůrazňuje jeho význam při propojování základních neurovědeckých objevů s klinickými aplikacemi, zejména při vývoji cílené léčby glioblastomu.

Tkáň
Mozek
Nemoc
Astrocytom
Synonyma
  • U-251MG
  • U-251-MG
  • U-251_MG
  • U251-MG
  • U251MG
  • U-251
  • U251
  • U251n
  • U251N
  • 251 MG
  • 251MG

02Klasifikace

Organismus
Člověk
Sex
Muž
Růstové vlastnosti
Přívrženec
Úroveň biologické bezpečnosti
1

03Charakteristika

Morfologie
Epitelu podobné
Doba zdvojnásobení
24 hodin

04Identifikátory

Citace
U-251 MG (katalogové číslo Cytion 300385)
Daňové identifikační číslo NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0021

05Exprese a náchylnost

Exprese proteinů
Exprese GFAP a vimentinu

06Manipulace a chov

Pěstovací médium
DMEM, w: 4,5 g/l glukózy, w: 4 mM L-glutaminu, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pyruvátu sodného (číslo výrobku Cytion 820300a)
Inkubační atmosféra

37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.

Doplňky stravy
Doplňte médium o 10% FBS
Disociační činidlo
Accutase
Subkultivace
Odstraňte staré médium z adherovaných buněk a promyjte je PBS bez vápníku a hořčíku. Pro baňky T25 použijte 3-5 ml PBS a pro baňky T75 5-10 ml. Poté buňky zcela zakryjte přípravkem Accutase, přičemž použijte 1-2 ml pro baňky T25 a 2,5 ml pro baňky T75. Nechte buňky inkubovat při pokojové teplotě po dobu 8-10 minut, aby se oddělily. Po inkubaci jemně promíchejte buňky s 10 ml média, aby byly znovu suspendovány, a poté je odstřeďte při 300xg po dobu 3 minut. Supernatant vyhoďte, buňky znovu rozpusťte v čerstvém médiu a přeneste je do nových baněk, které již obsahují čerstvé médium.
Hustota výsevu
1 x 104 buněk/cm2
Obnova tekutin
2 až 3krát týdně
Zotavení po rozmrazení
Rychle, do 24 hodin
Rozmrazování a kultivace
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kvality a kryokonzervace

Sterilita

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Mrazicí médium
Jako kryokonzervační médium používáme 50% základní médium + 40% FBS + 10% DMSO nebo CM-1 (katalogové číslo Cytion 800100), které obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory pro zlepšení regenerace a snížení stresu vyvolaného kryo.
Podmínky skladování

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Dopravní podmínky

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

08Dárce

Věk dárce
75 let
Etnická příslušnost
Kavkazský