LN229

LN229 je lidská glioblastomová buněčná linie odvozená od 60leté bělošské pacientky s multiformním glioblastomem (GBM), konkrétně z pravé frontální parieto-okcipitální kůry. Glioblastom je jednou z nejagresivnějších a nejsmrtelnějších forem rakoviny mozku a buňky LN229 jsou hojně využívány ve výzkumu, jehož cílem je pochopit molekulární podstatu tohoto onemocnění a vyvinout potenciální terapeutické strategie. Buňky vykazují morfologii podobnou epitelu a mají adherentní růstové vlastnosti, což je činí ideálními pro studie in vitro. Vzhledem k jejich vysokému tumorigennímu potenciálu se po injekčním podání nahým myším snadno vytvářejí nádory, což z nich činí robustní model pro výzkum rakoviny.

Jednou z kritických charakteristik buněk LN229 je přítomnost mutovaného genu p53 (TP53) se specifickou mutací CCT (Pro) na CTT (Leu) v kodonu 98. Tento gen je pro buňky LN229 typický. Tato mutace významně přispívá k agresivnímu chování buněčné linie a její odolnosti vůči apoptóze. Buňky LN229 mají navíc gen PTEN divokého typu, ale vykazují homozygotní delece v nádorových supresorových genech p16 a p14ARF, které jsou životně důležitými regulátory buněčného cyklu a apoptózy. Tyto genetické změny činí z LN229 cenný model pro studium vlivu těchto mutací na biologii nádorů a rezistenci k léčbě.

Buňky LN229 jsou zvláště užitečné při studiu apoptózy. Po stimulaci ligandem Fas podléhají apoptóze, přičemž k buněčné smrti dochází do 16 hodin. Je zajímavé, že zatímco exprese Bcl-2 dokáže ochránit buňky LN229 před apoptózou vyvolanou ligandem Fas, poskytuje pouze omezenou ochranu před apoptózou vyvolanou puromycinem, inhibitorem syntézy proteinů. Tento selektivní vzorec rezistence činí z buněk LN229 kritický model pro pochopení molekulárních mechanismů apoptózy u glioblastomu a pro testování potenciálních terapií modulujících apoptózu. Stejně jako všechny výzkumné modely in vitro nejsou buňky LN229 vhodné pro terapeutické nebo in vivo aplikace.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení