LN229

LN229 è una linea cellulare umana di glioblastoma derivata da un paziente bianco di 60 anni affetto da glioblastoma multiforme (GBM), in particolare dalla corteccia frontale parieto-occipitale destra. Il glioblastoma è una delle forme più aggressive e letali di cancro al cervello e le cellule LN229 sono ampiamente utilizzate nella ricerca per comprendere le basi molecolari della malattia e sviluppare potenziali strategie terapeutiche. Le cellule hanno una morfologia simile a quella epiteliale e presentano proprietà di crescita aderente, che le rendono ideali per gli studi in vitro. Dato il loro elevato potenziale tumorigenico, formano prontamente tumori quando vengono iniettate in topi nudi, il che le rende un modello robusto per la ricerca sul cancro.

Una delle caratteristiche fondamentali delle cellule LN229 è la presenza di un gene p53 mutato (TP53), con una specifica mutazione da CCT (Pro) a CTT (Leu) al codone 98. Questa mutazione contribuisce in modo significativo alla formazione del tumore. Questa mutazione contribuisce in modo significativo al comportamento aggressivo e alla resistenza all'apoptosi della linea cellulare. Inoltre, le cellule LN229 hanno un gene PTEN di tipo selvatico, ma presentano delezioni omozigoti nei geni soppressori tumorali p16 e p14ARF, che sono regolatori vitali del ciclo cellulare e dell'apoptosi. Queste alterazioni genetiche rendono le LN229 un modello prezioso per studiare l'impatto di queste mutazioni sulla biologia del tumore e sulla resistenza terapeutica.

Le cellule LN229 sono particolarmente utili per gli studi sull'apoptosi. Esse vanno incontro ad apoptosi dopo la stimolazione con il ligando Fas, con morte cellulare che si verifica entro 16 ore. È interessante notare che, mentre l'espressione di Bcl-2 può proteggere le cellule LN229 dall'apoptosi indotta dal ligando Fas, offre solo una protezione limitata contro l'apoptosi indotta dalla puromicina, un inibitore della sintesi proteica. Questo modello di resistenza selettiva rende le cellule LN229 un modello critico per la comprensione dei meccanismi molecolari dell'apoptosi nel glioblastoma e per la sperimentazione di potenziali terapie che modifichino l'apoptosi. Come tutti i modelli di ricerca in vitro, le cellule LN229 non sono adatte per applicazioni terapeutiche o in vivo.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia