LN229

LN229 es una línea celular de glioblastoma humano derivada de una paciente blanca de 60 años con glioblastoma multiforme (GBM), concretamente de la corteza frontal parieto-occipital derecha. El glioblastoma es una de las formas más agresivas y letales de cáncer cerebral, y las células LN229 se utilizan ampliamente en la investigación para comprender los fundamentos moleculares de la enfermedad y desarrollar posibles estrategias terapéuticas. Las células presentan una morfología similar a la epitelial y exhiben propiedades de crecimiento adherente, lo que las hace ideales para estudios in vitro. Dado su alto potencial tumorigénico, forman tumores con facilidad cuando se inyectan en ratones desnudos, lo que las convierte en un modelo sólido para la investigación del cáncer.

Una de las características críticas de las células LN229 es la presencia de una mutación en el gen p53 (TP53), con una mutación específica de CCT (Pro) a CTT (Leu) en el codón 98. Esta mutación contribuye significativamente a la formación de tumores. Esta mutación contribuye significativamente al comportamiento agresivo de la línea celular y a su resistencia a la apoptosis. Además, las células LN229 tienen un gen PTEN de tipo salvaje, pero presentan deleciones homocigóticas en los genes supresores tumorales p16 y p14ARF, que son reguladores vitales del ciclo celular y la apoptosis. Estas alteraciones genéticas hacen de LN229 un modelo valioso para estudiar el impacto de estas mutaciones en la biología tumoral y la resistencia terapéutica.

Las células LN229 son especialmente útiles para los estudios de apoptosis. Sufren apoptosis tras la estimulación con ligando Fas, produciéndose la muerte celular en 16 horas. Curiosamente, mientras que la expresión de Bcl-2 puede proteger a las células LN229 de la apoptosis inducida por el ligando Fas, sólo ofrece una protección limitada frente a la apoptosis inducida por la puromicina, un inhibidor de la síntesis proteica. Este patrón de resistencia selectiva convierte a las células LN229 en un modelo crítico para comprender los mecanismos moleculares de la apoptosis en el glioblastoma y para probar posibles terapias moduladoras de la apoptosis. Como ocurre con todos los modelos de investigación in vitro, las células LN229 no son adecuadas para aplicaciones terapéuticas o in vivo.

37°C, 5%_CO2, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante los 60 días posteriores al envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales se ajustan a las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o Hoja de Producto

Para más información, consulte nuestra <a href=""/Quiénes somos/Garantía/"" hreflang=""x-default"">Declaración de garantía