LN229

LN229 je celična linija človeškega glioblastoma, pridobljena od 60-letne bele bolnice z multiformnim glioblastomom (GBM), zlasti iz desne frontalne parieto-okcipitalne skorje. Glioblastom je ena najbolj agresivnih in smrtonosnih oblik možganskega raka, celice LN229 pa se pogosto uporabljajo v raziskavah za razumevanje molekularnih osnov bolezni in razvoj potencialnih terapevtskih strategij. Celice imajo morfologijo, podobno epitelijski, in adherentne rastne lastnosti, zaradi česar so idealne za študije in vitro. Zaradi visokega tumorigenega potenciala zlahka tvorijo tumorje, ko jih vbrizgamo golim mišim, zato so zanesljiv model za raziskave raka.

Ena od ključnih značilnosti celic LN229 je prisotnost mutiranega gena p53 (TP53) s specifično mutacijo CCT (Pro) v CTT (Leu) na kodonu 98. Ta mutacija pomembno prispeva k agresivnemu obnašanju celične linije in odpornosti na apoptozo. Poleg tega imajo celice LN229 gen PTEN divjega tipa, vendar imajo homozigotne delecije tumorskih supresorskih genov p16 in p14ARF, ki sta ključna regulatorja celičnega cikla in apoptoze. Zaradi teh genetskih sprememb je LN229 dragocen model za preučevanje vpliva teh mutacij na biologijo tumorjev in odpornost na zdravljenje.

Celice LN229 so še posebej uporabne pri študijah apoptoze. Po stimulaciji z ligandom Fas v njih pride do apoptoze, pri čemer celice umrejo v 16 urah. Zanimivo je, da lahko izražanje Bcl-2 celice LN229 zaščiti pred apoptozo, povzročeno z ligandom Fas, medtem ko nudi le omejeno zaščito pred apoptozo, povzročeno s puromicinom, zaviralcem sinteze beljakovin. Zaradi te selektivne odpornosti so celice LN229 pomemben model za razumevanje molekularnih mehanizmov apoptoze pri glioblastomu in za testiranje potencialnih terapij, ki modulirajo apoptozo. Kot vsi raziskovalni modeli in vitro tudi celice LN229 niso primerne za terapevtsko uporabo ali uporabo in vivo.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo