Премини към съдържанието
LN229
Тъкан
Мозък, дясна фронтална теменно-тилна кора
Заболяване
Глиобластом
Синоними
LN 229, LN229, LNT-229

Документи

LN229

Cell line · Номер на продукта 305043

LN229 is a human glioblastoma cell line derived from a 60-year-old White female patient with glioblastoma multiforme (GBM), specifically from the right fr...

€430.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

LN229 е човешка клетъчна линия на глиобластом, получена от 60-годишна пациентка от бялата раса с мултиформен глиобластом (ГБМ), по-специално от дясната фронтална парието-окципитална кора. Глиобластомът е една от най-агресивните и смъртоносни форми на рак на мозъка, а клетките LN229 се използват широко в изследванията, за да се разберат молекулярните основи на заболяването и да се разработят потенциални терапевтични стратегии. Клетките имат епителноподобна морфология и притежават адхезивни свойства на растеж, което ги прави идеални за in vitro изследвания. Като се има предвид високият им туморен потенциал, те лесно образуват тумори при инжектиране в голи мишки, което ги прави надежден модел за изследване на рака.

Една от критичните характеристики на клетките LN229 е наличието на мутирал ген p53 (TP53) със специфична мутация от CCT (Pro) към CTT (Leu) в кодон 98. Тази мутация допринася в значителна степен за агресивното поведение на клетъчната линия и устойчивостта ѝ на апоптоза. Освен това клетките LN229 имат див тип ген PTEN, но при тях се наблюдават хомозиготни делеции в туморните супресорни гени p16 и p14ARF, които са жизненоважни регулатори на клетъчния цикъл и апоптозата. Тези генетични промени превръщат LN229 в ценен модел за изучаване на въздействието на тези мутации върху туморната биология и терапевтичната резистентност.

Клетките LN229 са особено полезни за изследване на апоптозата. Те се подлагат на апоптоза при стимулиране с Fas лиганд, като клетъчната смърт настъпва в рамките на 16 часа. Интересно е, че докато експресията на Bcl-2 може да защити LN229 клетките от Fas лиганд-индуцирана апоптоза, тя предлага само ограничена защита срещу апоптоза, индуцирана от пуромицин, инхибитор на протеиновия синтез. Този модел на селективна резистентност прави LN229 клетките критичен модел за разбиране на молекулярните механизми на апоптозата при глиобластома и за тестване на потенциални терапии, модулиращи апоптозата. Както всички модели за in vitro изследвания, клетките LN229 не са подходящи за терапевтични или in vivo приложения.

Тъкан
Мозък, дясна фронтална теменно-тилна кора
Заболяване
Глиобластом
Синоними
  • LN 229
  • LN229
  • LNT-229

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Женски
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Епителиален
Време за удвояване
31 часа

04Идентификатори

Източник
LN229 (каталожен номер на Cytion 305043)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_0393

05Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

07Дарител

Възраст на донора
60 години
Етническа принадлежност
Европейски