Ga naar de inhoud
LN229
Weefsel
Hersenen, rechter frontale pariëto-occipitale cortex
Ziekte
Glioblastoom
Synoniemen
LN 229, LN229, LNT-229

Documenten

LN229

Cell line · Productnummer 305043

LN229 is a human glioblastoma cell line derived from a 60-year-old White female patient with glioblastoma multiforme (GBM), specifically from the right fr...

€430.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

LN229 is een menselijke glioblastoomcellijn afkomstig van een 60-jarige blanke vrouwelijke patiënt met glioblastoma multiforme (GBM), specifiek van de rechter frontale pariëto-occipitale cortex. Glioblastoom is een van de meest agressieve en dodelijke vormen van hersenkanker en LN229 cellen worden uitgebreid gebruikt in onderzoek om de moleculaire onderbouwing van de ziekte te begrijpen en om potentiële therapeutische strategieën te ontwikkelen. De cellen hebben een epitheliale morfologie en vertonen aanhechtende groei-eigenschappen, waardoor ze ideaal zijn voor in vitro onderzoek. Gezien hun hoge tumorigene potentieel vormen ze gemakkelijk tumoren wanneer ze geïnjecteerd worden in naakte muizen, waardoor ze een robuust model vormen voor kankeronderzoek.

Een van de kritieke kenmerken van LN229-cellen is de aanwezigheid van een gemuteerd p53-gen (TP53), met een specifieke CCT (Pro) naar CTT (Leu) mutatie bij codon 98. Deze mutatie draagt aanzienlijk bij aan de celsterfte. Deze mutatie draagt aanzienlijk bij aan het agressieve gedrag van de cellijn en de resistentie tegen apoptose. Daarnaast hebben LN229-cellen een wild-type PTEN-gen, maar vertonen ze homozygote deleties in de tumorsuppressorgenen p16 en p14ARF, die vitale regulatoren zijn van de celcyclus en apoptose. Deze genetische veranderingen maken LN229 tot een waardevol model voor het bestuderen van de invloed van deze mutaties op tumorbiologie en therapeutische resistentie.

LN229 cellen zijn vooral nuttig bij apoptosestudies. Ze ondergaan apoptose na stimulatie met Fas-ligand, waarbij de celdood binnen 16 uur optreedt. Interessant is dat, terwijl Bcl-2 expressie LN229 cellen kan beschermen tegen Fas ligand-geïnduceerde apoptose, het slechts beperkte bescherming biedt tegen apoptose geïnduceerd door puromycine, een remmer van de eiwitsynthese. Dit selectieve resistentiepatroon maakt LN229 cellen tot een cruciaal model voor het begrijpen van de moleculaire mechanismen van apoptose in glioblastoma en voor het testen van potentiële apoptosemodulerende therapieën. Zoals alle in vitro onderzoeksmodellen zijn LN229 cellen niet geschikt voor therapeutische of in vivo toepassingen.

Weefsel
Hersenen, rechter frontale pariëto-occipitale cortex
Ziekte
Glioblastoom
Synoniemen
  • LN 229
  • LN229
  • LNT-229

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Vrouw
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Epitheel
Verdubbelingstijd
31 uur

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
LN229 (Cytion catalogusnummer 305043)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0393

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Leeftijd van de donor
60 jaar
Etnische afkomst
Europese