LN229

Az LN229 egy humán glioblasztóma sejtvonal, amely egy 60 éves fehér nőbeteg glioblastoma multiforme (GBM) betegből származik, kifejezetten a jobb frontális parieto-occipitális kéregből. A glioblasztóma az agydaganat egyik legagresszívabb és leghalálosabb formája, és az LN229 sejteket széles körben használják a kutatásban a betegség molekuláris alapjainak megértésére és a lehetséges terápiás stratégiák kifejlesztésére. A sejtek epithelszerű morfológiát mutatnak és tapadó növekedési tulajdonságokkal rendelkeznek, ami ideális in vitro vizsgálatokhoz. Nagy tumorigén potenciáljuk miatt könnyen képeznek daganatokat, amikor meztelen egerekbe injektálják őket, ami a rákkutatás robusztus modelljévé teszi őket.

Az LN229 sejtek egyik kritikus jellemzője a mutáns p53 gén (TP53) jelenléte, amely a 98-as kodonnál egy specifikus CCT (Pro) CTT (Leu) mutációval rendelkezik. Ez a mutáció jelentősen hozzájárul a sejtvonal agresszív viselkedéséhez és az apoptózissal szembeni rezisztenciájához. Ezenkívül az LN229 sejtek vad típusú PTEN génnel rendelkeznek, de homozigóta deléciókat mutatnak a p16 és p14ARF tumorszupresszor génekben, amelyek a sejtciklus és az apoptózis létfontosságú szabályozói. Ezek a genetikai változások az LN229-et értékes modellé teszik e mutációk tumorbiológiára és terápiás rezisztenciára gyakorolt hatásának tanulmányozására.

Az LN229 sejtek különösen hasznosak az apoptózis vizsgálatában. Fas liganddal történő stimuláció hatására apoptózisba kerülnek, és a sejthalál 16 órán belül bekövetkezik. Érdekes módon, míg a Bcl-2 expresszió képes megvédeni az LN229 sejteket a Fas ligandum által kiváltott apoptózistól, addig a fehérjeszintézist gátló puromycin által kiváltott apoptózissal szemben csak korlátozott védelmet nyújt. Ez a szelektív rezisztenciaminta teszi az LN229 sejteket kritikus modellé a glioblasztóma apoptózisának molekuláris mechanizmusainak megértéséhez és a potenciális apoptózismoduláló terápiák teszteléséhez. Mint minden in vitro kutatási modell, az LN229 sejtek sem alkalmasak terápiás vagy in vivo alkalmazásra.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban