Langsung ke isi
LN229
Tisu
Otak, korteks parieto-oksipital frontal kanan
Penyakit
Glioblastoma
Sinonim
LN 229, LN229, LNT-229

LN229

Cell line · Nomor produk 305043

LN229 is a human glioblastoma cell line derived from a 60-year-old White female patient with glioblastoma multiforme (GBM), specifically from the right fr...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim
Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

LN229 adalah garis sel glioblastoma manusia yang berasal dari pasien wanita kulit putih berusia 60 tahun dengan glioblastoma multiforme (GBM), khususnya dari korteks parieto-oksipital frontal kanan. Glioblastoma adalah salah satu bentuk kanker otak yang paling agresif dan mematikan, dan sel LN229 banyak digunakan dalam penelitian untuk memahami dasar-dasar molekuler penyakit ini dan untuk mengembangkan strategi terapeutik yang potensial. Sel-sel ini menunjukkan morfologi seperti epitel dan menunjukkan sifat pertumbuhan yang melekat, yang membuatnya ideal untuk studi in vitro. Mengingat potensi tumorigeniknya yang tinggi, sel ini dengan mudah membentuk tumor saat disuntikkan ke tikus telanjang, menjadikannya model yang kuat untuk penelitian kanker.

Salah satu karakteristik penting dari sel LN229 adalah adanya gen p53 yang bermutasi (TP53), dengan mutasi CCT (Pro) ke CTT (Leu) yang spesifik pada kodon 98. Mutasi ini berkontribusi secara signifikan terhadap perilaku agresif dan resistensi garis sel terhadap apoptosis. Selain itu, sel LN229 memiliki gen PTEN tipe liar, tetapi mereka menunjukkan penghapusan homozigot pada gen penekan tumor p16 dan p14ARF, yang merupakan pengatur penting siklus sel dan apoptosis. Perubahan genetik ini membuat LN229 menjadi model yang berharga untuk mempelajari dampak mutasi ini pada biologi tumor dan resistensi terapeutik.

Sel LN229 sangat berguna dalam studi apoptosis. Mereka mengalami apoptosis setelah dirangsang dengan ligan Fas, dengan kematian sel yang terjadi dalam waktu 16 jam. Menariknya, sementara ekspresi Bcl-2 dapat melindungi sel LN229 dari apoptosis yang diinduksi oleh ligan Fas, ia hanya menawarkan perlindungan terbatas terhadap apoptosis yang diinduksi oleh puromisin, penghambat sintesis protein. Pola resistensi selektif ini menjadikan sel LN229 sebagai model penting untuk memahami mekanisme molekuler apoptosis pada glioblastoma dan untuk menguji potensi terapi modulasi apoptosis. Seperti halnya semua model penelitian in vitro, sel LN229 tidak cocok untuk aplikasi terapeutik atau in vivo.

Tisu
Otak, korteks parieto-oksipital frontal kanan
Penyakit
Glioblastoma
Sinonim
  • LN 229
  • LN229
  • LNT-229

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Perempuan
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Epitel
Waktu penggandaan
31 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
LN229 (nomor katalog Cytion 305043)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0393

05Penanganan dan budidaya

Media kultur
DMEM, w: 4,5 g/L Glukosa, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natrium piruvat (Nomor artikel Cytion 820300a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

07Donatur

Usia donor
60 tahun
Etnis
Eropa