الانتقال إلى المحتوى
LN229
الأنسجة
الدماغ، القشرة القشرية الجدارية القفوية الأمامية اليمنى
المرض
الورم الأرومي الدبقي
المرادفات
LN 229, LN229, LNT-229

المستندات

LN229

Cell line · رقم المنتج 305043

LN229 is a human glioblastoma cell line derived from a 60-year-old White female patient with glioblastoma multiforme (GBM), specifically from the right fr...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

LN229 هو سلالة خلايا الورم الأرومي الدبقي البشري المشتقة من مريضة بيضاء تبلغ من العمر 60 عاماً مصابة بالورم الأرومي الدبقي متعدد الأشكال (GBM)، وتحديداً من القشرة الأمامية الجدارية القفوية اليمنى. يُعد الورم الأرومي الدبقي الدبقي أحد أكثر أشكال سرطان الدماغ عدوانية وفتكاً، وتُستخدم خلايا LN229 على نطاق واسع في الأبحاث لفهم الأسس الجزيئية للمرض وتطوير استراتيجيات علاجية محتملة. تُظهر الخلايا مورفولوجيا شبيهة بالظهارة وتظهر خصائص نمو ملتصقة، مما يجعلها مثالية للدراسات المختبرية. ونظراً لقدرتها العالية على تكوين الأورام، فإنها تشكل أوراماً بسهولة عند حقنها في الفئران العارية، مما يجعلها نموذجاً قوياً لأبحاث السرطان.

تتمثل إحدى الخصائص الهامة لخلايا LN229 في وجود طفرة في الجين p53 (TP53)، مع طفرة محددة من CCT (Pro) إلى CTT (Leu) عند الكودون 98. وتساهم هذه الطفرة بشكل كبير في السلوك العدواني لخط الخلايا ومقاومته لموت الخلايا المبرمج. وبالإضافة إلى ذلك، تحتوي خلايا LN229 على جين PTEN من النوع الجامح، لكنها تُظهر حذفاً متماثلاً في جيني p16 و p14ARF الكابتين للورم، وهما منظمان حيويان لدورة الخلية وموت الخلايا المبرمج. تجعل هذه التغييرات الجينية من LN229 نموذجاً قيماً لدراسة تأثير هذه الطفرات على بيولوجيا الورم والمقاومة العلاجية.

تُعد خلايا LN229 مفيدة بشكل خاص في دراسات موت الخلايا المبرمج. فهي تخضع لموت الخلايا المبرمج عند تحفيزها بـ"فاس ليغاند"، حيث يحدث موت الخلايا في غضون 16 ساعة. ومن المثير للاهتمام أنه في حين أن تعبير Bcl-2 يمكن أن يحمي خلايا LN229 من موت الخلايا المبرمج الناجم عن ليغاند فاس، فإنه يوفر حماية محدودة فقط ضد موت الخلايا المبرمج الناجم عن البروميسين الذي يحفزه البروميسين، وهو مثبط لتخليق البروتين. يجعل هذا النمط الانتقائي للمقاومة من خلايا LN229 نموذجًا مهمًا لفهم الآليات الجزيئية لموت الخلايا المبرمج في الورم الأرومي الدبقي المبرمج ولاختبار العلاجات المحتملة لتعديل موت الخلايا المبرمج. وكما هو الحال مع جميع النماذج البحثية المختبرية، فإن خلايا LN229 ليست مناسبة للتطبيقات العلاجية أو في الجسم الحي.

الأنسجة
الدماغ، القشرة القشرية الجدارية القفوية الأمامية اليمنى
المرض
الورم الأرومي الدبقي
المرادفات
  • LN 229
  • LN229
  • LNT-229

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
الظهارة
زمن المضاعفة
31 ساعة

04المعرّفات

المرجع
LN229 (رقم الكتالوج لدى Cytion: 305043)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_0393

05التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

07المانح

عمر المتبرع
60 عاماً
الأصل العرقي
أوروبي