Gå direkt till innehållet
LN229
Vävnad
Hjärna, höger frontala parieto-occipitala cortex
Sjukdom
Glioblastom
Synonymer
LN 229, LN229, LNT-229

LN229

Cell line · Produktnummer 305043

LN229 is a human glioblastoma cell line derived from a 60-year-old White female patient with glioblastoma multiforme (GBM), specifically from the right fr...

€430.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
  • CoA
1

01Allmän information

Beskrivning

LN229 är en human glioblastomcellinje som härrör från en 60-årig vit kvinnlig patient med glioblastoma multiforme (GBM), specifikt från höger frontala parieto-occipitala cortex. Glioblastom är en av de mest aggressiva och dödliga formerna av hjärncancer, och LN229-celler används i stor utsträckning i forskning för att förstå sjukdomens molekylära bakgrund och för att utveckla potentiella behandlingsstrategier. Cellerna har en epitelliknande morfologi och uppvisar adherenta tillväxtegenskaper, vilket gör dem idealiska för in vitro-studier. Med tanke på deras höga tumörframkallande potential bildar de lätt tumörer när de injiceras i nakna möss, vilket gör dem till en robust modell för cancerforskning.

En av de viktigaste egenskaperna hos LN229-cellerna är förekomsten av en muterad p53-gen (TP53), med en specifik CCT (Pro)- till CTT (Leu)-mutation vid kodon 98. Denna mutation bidrar väsentligt till cellinjens aggressiva beteende och motståndskraft mot apoptos. Dessutom har LN229-cellerna en PTEN-gen av vildtyp, men de uppvisar homozygota deletioner i tumörsuppressorgenerna p16 och p14ARF, som är viktiga regulatorer av cellcykeln och apoptos. Dessa genetiska förändringar gör LN229 till en värdefull modell för att studera dessa mutationers inverkan på tumörbiologi och behandlingsresistens.

LN229-celler är särskilt användbara i apoptosstudier. De genomgår apoptos efter stimulering med Fas-ligand, och celldöden inträffar inom 16 timmar. Intressant nog kan Bcl-2-uttryck skydda LN229-celler från Fas-ligandinducerad apoptos, men det ger bara ett begränsat skydd mot apoptos som induceras av puromycin, en proteinsynteshämmare. Detta selektiva resistensmönster gör LN229-cellerna till en viktig modell för att förstå de molekylära mekanismerna bakom apoptos i glioblastom och för att testa potentiella apoptosmodulerande behandlingar. Som med alla in vitro -forskningsmodeller är LN229-celler inte lämpliga för terapeutiska eller in vivo-tillämpningar.

Vävnad
Hjärna, höger frontala parieto-occipitala cortex
Sjukdom
Glioblastom
Synonymer
  • LN 229
  • LN229
  • LNT-229

02Klassificering

Organism
Människa
Kön
Kvinna
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelial
Fördubblingstid
31 timmar

04Identifierare

Källa
LN229 (Cytion katalognummer 305043)
NCBI-skattenummer
9606
Cellosaurus
CVCL_0393

05Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

07Donator

Donatorns ålder
60 år
Etnicitet
Europeiska