LN229

A LN229 é uma linha celular de glioblastoma humano derivada de uma doente branca de 60 anos com glioblastoma multiforme (GBM), especificamente do córtex parieto-occipital frontal direito. O glioblastoma é uma das formas mais agressivas e letais de cancro do cérebro e as células LN229 são amplamente utilizadas na investigação para compreender os fundamentos moleculares da doença e para desenvolver potenciais estratégias terapêuticas. As células apresentam uma morfologia semelhante à epitelial e exibem propriedades de crescimento aderente, o que as torna ideais para estudos in vitro. Dado o seu elevado potencial tumorigénico, formam facilmente tumores quando injectadas em ratinhos nus, o que as torna um modelo robusto para a investigação do cancro.

Uma das caraterísticas críticas das células LN229 é a presença de um gene p53 mutado (TP53), com uma mutação específica de CCT (Pro) para CTT (Leu) no códão 98. Esta mutação contribui significativamente para o comportamento agressivo da linha celular e para a resistência à apoptose. Além disso, as células LN229 têm um gene PTEN de tipo selvagem, mas exibem deleções homozigóticas nos genes supressores de tumor p16 e p14ARF, que são reguladores vitais do ciclo celular e da apoptose. Estas alterações genéticas fazem das células LN229 um modelo valioso para estudar o impacto destas mutações na biologia tumoral e na resistência terapêutica.

As células LN229 são particularmente úteis em estudos de apoptose. Sofrem apoptose após estimulação com o ligando Fas, com a morte celular a ocorrer no espaço de 16 horas. Curiosamente, embora a expressão de Bcl-2 possa proteger as células LN229 da apoptose induzida pelo ligando Fas, apenas oferece uma proteção limitada contra a apoptose induzida pela puromicina, um inibidor da síntese proteica. Este padrão de resistência selectiva faz das células LN229 um modelo essencial para compreender os mecanismos moleculares da apoptose no glioblastoma e para testar potenciais terapias moduladoras da apoptose. Tal como acontece com todos os modelos de investigação in vitro, as células LN229 não são adequadas para aplicações terapêuticas ou in vivo.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia