LN229

LN229は、60歳の白人女性多形膠芽腫（GBM）患者、特に右前頭部頭頂後頭皮質由来のヒト膠芽腫細胞株である。膠芽腫は最も侵攻性が高く致死的な脳腫瘍の一つであり、LN229細胞はこの疾患の分子基盤を理解し、潜在的な治療戦略を開発するための研究に広く用いられている。LN229細胞は上皮様形態を示し、接着増殖特性を示すため、in vitroでの研究に理想的である。腫瘍形成能が高いため、ヌードマウスに注入すると容易に腫瘍を形成し、がん研究のための強固なモデルとなる。

LN229細胞の重要な特徴の一つは、コドン98に特異的なCCT（Pro）からCTT（Leu）への変異を持つ変異p53遺伝子（TP53）の存在である。この変異は、この細胞株の攻撃的な挙動とアポトーシスに対する抵抗性に大きく寄与している。さらに、LN229細胞は野生型PTEN遺伝子を持つが、細胞周期とアポトーシスの重要な制御因子であるp16とp14ARF癌抑制遺伝子にホモ接合性欠失を示す。これらの遺伝子変化によって、LN229は腫瘍生物学や治療抵抗性に対するこれらの変異の影響を研究するための貴重なモデルとなっている。

LN229細胞はアポトーシス研究において特に有用である。LN229細胞はFasリガンドで刺激するとアポトーシスを起こし、細胞死は16時間以内に起こる。興味深いことに、Bcl-2の発現はFasリガンドによるアポトーシスからLN229細胞を保護することができるが、タンパク質合成阻害剤であるピューロマイシンによって誘導されるアポトーシスに対しては限定的な保護しか提供しない。この選択的耐性パターンにより、LN229細胞は膠芽腫におけるアポトーシスの分子メカニズムを理解し、アポトーシス調節療法の可能性を検証するための重要なモデルとなっている。すべてのin vitro研究モデルと同様に、LN229細胞は治療やin vivo応用には適していない。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。