LN229

LN229, 60 yaşında glioblastoma multiforme (GBM) hastası beyaz bir kadından, özellikle de sağ frontal parieto-oksipital korteksten elde edilen bir insan glioblastoma hücre hattıdır. Glioblastoma, beyin kanserinin en agresif ve ölümcül formlarından biridir ve LN229 hücreleri, hastalığın moleküler temellerini anlamak ve potansiyel terapötik stratejiler geliştirmek için araştırmalarda yaygın olarak kullanılmaktadır. Hücreler epitel benzeri bir morfoloji sergiler ve yapışık büyüme özellikleri gösterir, bu da onları in vitro çalışmalar için ideal kılar. Yüksek tümörijenik potansiyelleri göz önüne alındığında, çıplak farelere enjekte edildiklerinde kolayca tümör oluştururlar ve bu da onları kanser araştırmaları için sağlam bir model haline getirir.

LN229 hücrelerinin kritik özelliklerinden biri, kodon 98'de spesifik bir CCT (Pro) - CTT (Leu) mutasyonu ile mutasyona uğramış bir p53 geninin (TP53) varlığıdır. Bu mutasyon, hücre hattının agresif davranışına ve apoptoza direncine önemli ölçüde katkıda bulunur. Ek olarak, LN229 hücreleri vahşi tip PTEN genine sahiptir, ancak hücre döngüsü ve apoptozun hayati düzenleyicileri olan p16 ve p14ARF tümör baskılayıcı genlerinde homozigot delesyonlar sergilerler. Bu genetik değişiklikler, LN229'u bu mutasyonların tümör biyolojisi ve terapötik direnç üzerindeki etkisini incelemek için değerli bir model haline getirmektedir.

LN229 hücreleri apoptoz çalışmalarında özellikle yararlıdır. Fas ligand ile uyarılmaları üzerine apoptoza uğrarlar ve hücre ölümü 16 saat içinde gerçekleşir. İlginç bir şekilde, Bcl-2 ekspresyonu LN229 hücrelerini Fas ligandının indüklediği apoptozdan koruyabilirken, bir protein sentezi inhibitörü olan puromisin tarafından indüklenen apoptoza karşı yalnızca sınırlı koruma sağlar. Bu seçici direnç modeli, LN229 hücrelerini glioblastomda apoptozun moleküler mekanizmalarını anlamak ve potansiyel apoptoz modüle edici tedavileri test etmek için kritik bir model haline getirmektedir. Tüm in vitro araştırma modellerinde olduğu gibi, LN229 hücreleri terapötik veya in vivo uygulamalar için uygun değildir.

37°C, %5_CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

Cytion olarak ürünlerimizin kalitesinin ve canlılığının arkasındayız. Hücrelerimizin, tesislerimizden sevkiyattan sonra 60 gün boyunca kültürün başlangıcında canlı olacağını garanti ediyoruz. Tüm malzemelerin Analiz Sertifikası ve/veya Ürün Sayfasında açıklanan özelliklere uygun olduğunu garanti ediyoruz

Tüm ayrıntılar için lütfen <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garanti Beyanımıza bakın