Перейти до вмісту
LN229
Тканина
Головний мозок, права лобова тім'яно-потилична кора
Хвороба
Гліобластома
Синоніми
LN 229, LN229, LNT-229

Документи

LN229

Cell line · Номер товару 305043

LN229 is a human glioblastoma cell line derived from a 60-year-old White female patient with glioblastoma multiforme (GBM), specifically from the right fr...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

LN229 - це клітинна лінія гліобластоми людини, отримана від 60-річної білої пацієнтки з мультиформною гліобластомою (МГБ), зокрема, з правої лобової тім'яно-потиличної ділянки кори головного мозку. Гліобластома є однією з найбільш агресивних і смертельних форм раку головного мозку, і клітини LN229 широко використовуються в дослідженнях для розуміння молекулярних основ захворювання і розробки потенційних терапевтичних стратегій. Клітини мають епітеліальну морфологію і демонструють властивості адгезійного росту, що робить їх ідеальними для досліджень in vitro. Враховуючи їх високий туморогенний потенціал, вони легко утворюють пухлини при введенні голим мишам, що робить їх надійною моделлю для дослідження раку.

Однією з найважливіших характеристик клітин LN229 є наявність мутованого гена р53 (TP53) зі специфічною мутацією CCT (Pro) на CTT (Leu) у кодоні 98. Ця мутація суттєво впливає на агресивну поведінку клітинної лінії та їхню стійкість до апоптозу. Крім того, клітини LN229 мають ген PTEN дикого типу, але мають гомозиготні делеції в генах-супресорах пухлин p16 і p14ARF, які є життєво важливими регуляторами клітинного циклу і апоптозу. Ці генетичні зміни роблять LN229 цінною моделлю для вивчення впливу цих мутацій на біологію пухлин та їхню терапевтичну резистентність.

Клітини LN229 особливо корисні для вивчення апоптозу. Вони зазнають апоптозу після стимуляції лігандом Fas, причому загибель клітин відбувається протягом 16 годин. Цікаво, що експресія Bcl-2 може захистити клітини LN229 від апоптозу, індукованого лігандом Fas, але вона лише обмежено захищає їх від апоптозу, індукованого пуроміцином, інгібітором синтезу білка. Така вибіркова резистентність робить клітини LN229 важливою моделлю для розуміння молекулярних механізмів апоптозу в гліобластомі та для тестування потенційних методів лікування, що модулюють апоптоз. Як і всі дослідницькі моделі in vitro, клітини LN229 не придатні для терапевтичного застосування або застосування in vivo.

Тканина
Головний мозок, права лобова тім'яно-потилична кора
Хвороба
Гліобластома
Синоніми
  • LN 229
  • LN229
  • LNT-229

02Класифікація

Організм
Людина
Секс
Жінка
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальний
Час подвоєння
31 година

04Ідентифікатори

Посилання
LN229 (номер у каталозі Cytion 305043)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
9606
Целозавр
CVCL_0393

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
ДМЕМ, w: 4,5 г/л Глюкоза, w: 4 мМ L-глутамін, w: 3,7 г/л NaHCO3, w: 1,0 мМ піруват натрію (цит. номер 820300a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Вік донора
60 років
Етнічна приналежність
Європейський