LN229

LN229 on ihmisen glioblastoomasolulinja, joka on peräisin 60-vuotiaalta valkoihoiselta naispotilaalta, jolla oli glioblastoma multiforme (GBM), erityisesti oikeasta otsa-, parieto- ja takaraivokuoresta. Glioblastooma on yksi aggressiivisimmista ja tappavimmista aivosyövän muodoista, ja LN229-soluja käytetään laajalti tutkimuksessa taudin molekulaaristen taustatekijöiden ymmärtämiseksi ja mahdollisten hoitostrategioiden kehittämiseksi. Soluilla on epiteelin kaltainen morfologia ja tarttuvat kasvuominaisuudet, mikä tekee niistä ihanteellisia in vitro -tutkimuksiin. Koska solut ovat erittäin tumorigeenisiä, ne muodostavat helposti kasvaimia, kun ne ruiskutetaan nude-hiiriin, mikä tekee niistä vankan mallin syöpätutkimukseen.

Yksi LN229-solujen kriittisistä ominaisuuksista on mutatoitunut p53-geeni (TP53), jossa on erityinen CCT (Pro) - CTT (Leu) -mutaatio kodonissa 98. Tämä mutaatio vaikuttaa merkittävästi solulinjan aggressiiviseen käyttäytymiseen ja vastustuskykyyn apoptoosille. Lisäksi LN229-soluilla on villityyppinen PTEN-geeni, mutta niissä on homotsygoottisia deleetioita p16- ja p14ARF-kasvainsuppressorigeeneissä, jotka ovat solusyklin ja apoptoosin elintärkeitä säätelijöitä. Nämä geneettiset muutokset tekevät LN229:stä arvokkaan mallin, jonka avulla voidaan tutkia näiden mutaatioiden vaikutusta kasvaimen biologiaan ja terapeuttiseen resistenssiin.

LN229-solut ovat erityisen hyödyllisiä apoptoositutkimuksissa. Niissä tapahtuu apoptoosi Fas-ligandilla stimuloitaessa, ja solukuolema tapahtuu 16 tunnin kuluessa. Mielenkiintoista on, että vaikka Bcl-2:n ilmentyminen voi suojata LN229-soluja Fas-ligandin aiheuttamalta apoptoosilta, se suojaa vain rajoitetusti proteiinisynteesin estäjän, puromysiinin, aiheuttamalta apoptoosilta. Tämä selektiivinen resistenssimalli tekee LN229-soluista kriittisen mallin, jonka avulla voidaan ymmärtää apoptoosin molekyylimekanismeja glioblastoomassa ja testata mahdollisia apoptoosia sääteleviä hoitomuotoja. Kuten kaikki in vitro -tutkimusmallit, LN229-solut eivät sovellu terapeuttisiin tai in vivo -sovelluksiin.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa