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U-251 MG
Tessuto
Cervello
Malattia
Astrocitoma
Sinonimi
U-251MG, U-251-MG, U-251_MG, U251-MG, U251MG, U-251, U251, U251n, U251N, 251 MG, 251MG

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U-251 MG

Cell line · Codice prodotto 300385

The U-251 MG cell line is a well-characterized human glioblastoma multiforme (GBM) cell line that is extensively used in neuro-oncology research. Derived ...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare U-251 MG è una linea cellulare umana ben caratterizzata di glioblastoma multiforme (GBM), ampiamente utilizzata nella ricerca neuro-oncologica. Derivata originariamente da un uomo caucasico di 75 anni, questa linea cellulare è stata fondamentale per lo studio dei tumori cerebrali, in particolare per la comprensione dei meccanismi molecolari e cellulari alla base dei gliomi maligni. Le cellule U-251 MG presentano proprietà astrocitarie, caratteristiche della loro origine dagli astrociti, il tipo di cellula predominante coinvolto nel GBM.

Dal punto di vista genetico, le cellule U-251 MG presentano mutazioni e alterazioni tipiche degli astrocitomi di alto grado, tra cui mutazioni nel gene TP53 e perdita di eterozigosi nel cromosoma 10, che comprende il gene PTEN. Queste caratteristiche genetiche contribuiscono all'utilità della linea cellulare nello studio delle funzioni dei geni soppressori dei tumori e delle vie cellulari coinvolte nella progressione e nella resistenza tumorale. Le cellule sono note anche per i loro robusti tassi di crescita in vitro e per la capacità di formare tumori quando vengono xenotrapiantate in topi immunocompromessi, il che le rende un modello prezioso per gli studi in vivo sulla crescita, l'invasione e la risposta alla terapia dei tumori.

Inoltre, l'U-251 MG è stato impiegato in una moltitudine di studi incentrati sugli approcci terapeutici, tra cui la resistenza alla chemioterapia, i risultati della radioterapia e la valutazione di nuovi composti antitumorali. Il suo ampio uso nella ricerca traslazionale evidenzia la sua importanza nel collegare le scoperte neuroscientifiche di base con le applicazioni cliniche, in particolare nello sviluppo di terapie mirate per il glioblastoma.

Tessuto
Cervello
Malattia
Astrocitoma
Sinonimi
  • U-251MG
  • U-251-MG
  • U-251_MG
  • U251-MG
  • U251MG
  • U-251
  • U251
  • U251n
  • U251N
  • 251 MG
  • 251MG

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tempo di raddoppio
24 ore

04Identificatori

Riferimento bibliografico
U-251 MG (numero di catalogo Cytion 300385)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0021

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Espressione di GFAP e vimentina

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
1 x 104 cellule/cm2
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Veloce, entro 24 ore
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo 50% di terreno basale + 40% di FBS + 10% di DMSO, o CM-1 (Cytion numero di catalogo 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crioindotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
75 anni
Etnia
Caucasico