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U87MG
Tessuto
Cervello
Malattia
Glioblastoma
Sinonimi
U-87MG, U87 MG, U-87-MG, U87-MG, U-87 MG, U-87, U87, 87 MG, 87MG

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U87MG

Cell line · Codice prodotto 300367

The U87MG cell line, established from a human glioblastoma, is one of the most widely utilized cellular models in neurobiological and cancer research. Ori...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare U87MG, derivata da un glioblastoma umano, è uno dei modelli cellulari più utilizzati nella ricerca neurobiologica e oncologica. Originate da un tumore maligno del sistema nervoso centrale, queste cellule presentano molte delle caratteristiche tipiche del glioblastoma multiforme (GBM), tra cui una rapida proliferazione, un'elevata invasività e una significativa eterogeneità genetica e fenotipica. Ciò rende la linea cellulare U87MG, nota anche come cellule U87, uno strumento prezioso per esplorare i meccanismi molecolari e cellulari alla base dei tumori cerebrali e per testare potenziali strategie terapeutiche.

Nella ricerca sulle neuroscienze e sull'immuno-oncologia, le cellule U87MG servono come modello per chiarire la funzione cellulare e i meccanismi di citotossicità nel glioblastoma, compresa l'esplorazione della citotossicità delle cellule NK. L'espressione dei ligandi NKG2D sulle cellule U87 e l'uso di anticorpi NKG2D negli studi evidenziano le intricate dinamiche tra le cellule tumorali e il sistema immunitario, in particolare le cellule NK, nel microambiente tumorale.

Le caratteristiche di staminalità delle cellule di glioblastoma U87, insieme ai loro attributi genetici e fenotipici, sono oggetto di intensi studi, con l'obiettivo di svelare i meccanismi che conferiscono a queste cellule un elevato grado di plasticità e resistenza alle terapie convenzionali. L'origine esatta della linea cellulare U87 rimane alquanto enigmatica, con analisi genetiche che rivelano differenze rispetto al tumore originale.

In sintesi, la linea cellulare U87 rimane uno strumento fondamentale per la ricerca sul glioblastoma, facilitando una più profonda comprensione della biologia della malattia e la ricerca di trattamenti più efficaci.

Tessuto
Cervello
Malattia
Glioblastoma
Sinonimi
  • U-87MG
  • U87 MG
  • U-87-MG
  • U87-MG
  • U-87 MG
  • U-87
  • U87
  • 87 MG
  • 87MG

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tumorigenico
Sì, in topi nudi inoculati per via sottocutanea con 107 cellule

04Identificatori

Riferimento bibliografico
U87MG (numero di catalogo Cytion 300367)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0022

05Espressione e suscettibilità

Isoenzimi
Me-2, 1, PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 1, G6PD, B

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (articolo Cytion numero 820100a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS e l'1% di NEAA
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
4 x 104 cellule/cm2
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo 50% di terreno basale + 40% di FBS + 10% di DMSO, o CM-1 (Cytion numero di catalogo 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crioindotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
44 anni
Etnia
Caucasico