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U-251 MG
Pañuelo de papel
Cerebro
Enfermedad
Astrocitoma
Sinónimos
U-251MG, U-251-MG, U-251_MG, U251-MG, U251MG, U-251, U251, U251n, U251N, 251 MG, 251MG

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U-251 MG

Cell line · Número de producto 300385

The U-251 MG cell line is a well-characterized human glioblastoma multiforme (GBM) cell line that is extensively used in neuro-oncology research. Derived ...

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01Información general

Descripción

La línea celular U-251 MG es una línea celular humana de glioblastoma multiforme (GBM) bien caracterizada que se utiliza ampliamente en la investigación neurooncológica. Derivada originalmente de un varón caucásico de 75 años, esta línea celular ha sido fundamental en el estudio de los tumores cerebrales, en particular para comprender los mecanismos moleculares y celulares subyacentes a los gliomas malignos. Las células U-251 MG presentan propiedades astrocíticas, características de su origen a partir de astrocitos, el tipo celular predominante en los GBM.

Genéticamente, las células U-251 MG albergan mutaciones y alteraciones típicas de los astrocitomas de alto grado, incluidas mutaciones en el gen TP53 y pérdida de heterocigosidad en el cromosoma 10, que engloba el gen PTEN. Estos rasgos genéticos contribuyen a la utilidad de la línea celular para estudiar las funciones de los genes supresores de tumores y las vías celulares implicadas en la progresión y resistencia tumorales. Las células también son conocidas por sus robustas tasas de crecimiento in vitro y su capacidad para formar tumores cuando se xenoinjertan en ratones inmunodeprimidos, lo que las convierte en un valioso modelo para estudios in vivo del crecimiento, la invasión y la respuesta terapéutica de los tumores.

Además, el U-251 MG se ha empleado en multitud de estudios centrados en enfoques terapéuticos, como la resistencia a la quimioterapia, los resultados de la radioterapia y la evaluación de nuevos compuestos contra el cáncer. Su amplio uso en la investigación traslacional pone de relieve su importancia como puente entre los descubrimientos neurocientíficos básicos y las aplicaciones clínicas, especialmente en el desarrollo de terapias dirigidas contra el glioblastoma.

Pañuelo de papel
Cerebro
Enfermedad
Astrocitoma
Sinónimos
  • U-251MG
  • U-251-MG
  • U-251_MG
  • U251-MG
  • U251MG
  • U-251
  • U251
  • U251n
  • U251N
  • 251 MG
  • 251MG

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
1

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tiempo de duplicación
24 horas

04Identificadores

Referencia
U-251 MG (número de catálogo 300385 de Cytion)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0021

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
Expresión de GFAP y vimentina

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Densidad de siembra
1 x 104 células/cm2
Renovación de fluidos
de 2 a 3 veces por semana
Recuperación tras la descongelación
Rápido, en 24 horas
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos 50% de medio basal + 40% de FBS + 10% de DMSO, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
75 años
Origen étnico
Caucásico