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U-251 MG
Tecido
Cérebro
Doença
Astrocitoma
Sinónimos
U-251MG, U-251-MG, U-251_MG, U251-MG, U251MG, U-251, U251, U251n, U251N, 251 MG, 251MG

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U-251 MG

Cell line · Número do produto 300385

The U-251 MG cell line is a well-characterized human glioblastoma multiforme (GBM) cell line that is extensively used in neuro-oncology research. Derived ...

€550.00sem impostos nem portes de envio
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01Informações gerais

Descrição

A linha celular U-251 MG é uma linha celular de glioblastoma multiforme (GBM) humano bem caracterizada, amplamente utilizada na investigação em neuro-oncologia. Derivada originalmente de um homem caucasiano de 75 anos, esta linha celular tem sido fundamental para o estudo dos tumores cerebrais, nomeadamente para compreender os mecanismos moleculares e celulares subjacentes aos gliomas malignos. As células U-251 MG apresentam propriedades astrocíticas, que são caraterísticas da sua origem nos astrócitos, o tipo de célula predominante envolvido no GBM.

Geneticamente, as células U-251 MG apresentam mutações e alterações típicas dos astrocitomas de alto grau, incluindo mutações no gene TP53 e perda de heterozigotia no cromossoma 10, que engloba o gene PTEN. Estas caraterísticas genéticas contribuem para a utilidade da linha celular no estudo das funções dos genes supressores de tumores e das vias celulares envolvidas na progressão e resistência dos tumores. As células são também conhecidas pelas suas taxas de crescimento in vitro robustas e pela sua capacidade de formar tumores quando xenografadas em ratinhos imunocomprometidos, o que as torna um modelo valioso para estudos in vivo do crescimento tumoral, da invasão e da resposta à terapêutica.

Além disso, o U-251 MG tem sido utilizado numa série de estudos centrados em abordagens terapêuticas, incluindo a resistência à quimioterapia, os resultados da radioterapia e a avaliação de novos compostos anticancerígenos. A sua utilização extensiva na investigação translacional realça a sua relevância na ligação entre as descobertas neurocientíficas básicas e as aplicações clínicas, particularmente no desenvolvimento de terapias direcionadas para o glioblastoma.

Tecido
Cérebro
Doença
Astrocitoma
Sinónimos
  • U-251MG
  • U-251-MG
  • U-251_MG
  • U251-MG
  • U251MG
  • U-251
  • U251
  • U251n
  • U251N
  • 251 MG
  • 251MG

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tempo de duplicação
24 horas

04Identificadores

Referência
U-251 MG (número de catálogo Cytion 300385)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0021

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
Expressão de GFAP e vimentina

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
1 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Recuperação após o descongelamento
Rápido, no prazo de 24 horas
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos 50% de meio basal + 40% de FBS + 10% de DMSO, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
75 anos
Etnia
Caucasiano