Pāriet uz saturu
U2OS
Audums
Kauls, stilba kauls
Slimība
Osteosarkoma
Sinonīmi
U-2 OS, U-2OS, U-2-OS, U2-OS, U20-S, U20S, 2T

Dokumenti

U2OS

Cell line · Preces numurs 300364

U2OS cells, an osteosarcoma cell line derived from a human osteosarcoma patient, play a significant role in cancer research, particularly in the study of ...

€430.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

U2OS šūnām - osteosarkomas šūnu līnijai, kas iegūta no cilvēka osteosarkomas pacienta - ir nozīmīga loma vēža pētījumos, jo īpaši kaulu vēža izpētē. U2OS šūnas tiek plaši izmantotas vēža pētījumos, zāļu izstrādē, apoptozes pētījumos, ģenētiskajos pētījumos un staru onkoloģijas pētījumos. U2OS šūnu vērtība ir to izmantošana apoptozes un rezistences pret zālēm izpētei, kas ir būtiski mazu molekulu inhibitoru un līdzīgu terapeitisko līdzekļu radīšanai.

Klīniskajos osteosarkomas pētījumos U2OS šūnu līnija ir noderīga, lai izpētītu bioloģisko reakciju uz staru terapiju, tādējādi bagātinot mūsu izpratni par osteosarkomas bioloģiju. Šīm šūnām ir arī izšķiroša nozīme hromatīna modifikāciju un to ietekmes uz šūnu bioloģiju izpētē, jo īpaši audzēju veidošanās un vēža progresēšanas kontekstā.

U2OS šūnu līnija, saukta arī par OS šūnu līniju, ir atzīta par in vivo audzēju veidošanas spēju, ievadot to ar zemādas un intramuskulāru injekciju palīdzību. U2OS šūnu radītie audzēji ir raksturojami kā augstas pakāpes sarkomas, un tiem ir raksturīga ievērojama osteoīda veidošanās, kas ir osteosarkomas pazīme. Turklāt šajos audzējos konstatēja imūnšūnu infiltrāciju. Tāpēc U2OS kalpo kā reprezentatīvs modelis cilvēka osteosarkomas, tās mijiedarbības ar cilvēka imūnsistēmu un audzēju imunoloģijas izpētei. Tomēr viens no izaicinājumiem ir nodrošināt, lai osteosarkomas U2OS šūnu līnija precīzi atspoguļotu audzējus in vivo, ņemot vērā audzēju veidošanās spēju mainību.

Rezumējot, tādas sarkomu šūnu līnijas kā U2OS kalpo kā galvenais instruments osteosarkomas izpratnei, sniedzot vērtīgu ieskatu vēža bioloģijā, terapijas izstrādē un audzēja un imūnsistēmas mijiedarbības sarežģītībā, vienlaikus uzsverot nepieciešamību pēc precīzas audzēju modelēšanas in vivo.

Audums
Kauls, stilba kauls
Slimība
Osteosarkoma
Sinonīmi
  • U-2 OS
  • U-2OS
  • U-2-OS
  • U2-OS
  • U20-S
  • U20S
  • 2T

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Sieviete
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Kariotips
(P11-46) hipodiploīdi līdz gandrīz tetraploīdiem, (P111-118) modālie skaitļi no 34 līdz 37 un no 64 līdz 67 ar anomālijām, ieskaitot dicentriju, pārrāvumus, gredzenus un pulverizācijas, kā arī acrocentriskus subtelocentriskus un minūtelementārus marķierus

04Identifikatori

Atsauce
U2OS (Cytion kataloga numurs 300364)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_0042

05Pazīmes un uzņēmība

Ekspresētie receptori
I insulīnam līdzīgais augšanas faktors (IGF-I), II insulīnam līdzīgais augšanas faktors (IGF-I), osteosarkomas atvasināts augšanas faktors (ODGF)
Antigēna ekspresija
A asinsgrupa, Rh+, HLA A2, Aw30, B12, Bw35, B40(+/-)
Izoenzīmi
PGM3, 1, PGM1, 2, ES-D, 1, AK-1, 1, GLO-1, 2, G6PD, B, Fenotipu biežuma produkts: 0.0082
Produkti
Osteosarkomas atvasināts augšanas faktors (ODGF)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM:Ham's F12 (1:1), w: 3,1 g/l glikozes, w: 2,5 mM L-glutamīna, w: 15 mM HEPES, w: 0,5 mM nātrija piruvāta, w: 1,2 g/l NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820400a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sēšanas blīvums
1 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
15 gadi
Etniskā piederība
Kaukāzietis